Pourquoi la norme USP 788 est importante : garantir la sécurité des patients grâce à des tests de particules dans les injections

Dans le domaine pharmaceutique, des réglementations strictes sont essentielles pour protéger les patients et garantir l'efficacité des produits. L'une des réglementations importantes est le chapitre 788 de la pharmacopée américaine (USP 788), qui fournit des directives pour tester les particules présentes dans les injections. 

Mais pourquoi est-ce important ? Les particules, souvent trop petites pour être visibles à l'œil nu, peuvent présenter des risques importants, en limitant la durée de conservation d'un produit et en compromettant la sécurité des patients. 

Si ces particules invisibles (1 à 100 µm) pénètrent dans le système circulatoire d'un patient par injection, elles peuvent provoquer une inflammation, voire un blocage des vaisseaux sanguins. C'est pourquoi les médicaments injectables doivent répondre à des exigences strictes afin de minimiser ce risque. 

La source de ces particules invisibles à l'œil nu peut varier : ingrédients pharmaceutiques actifs protéiques (API), excipients dégradés et/ou particules provenant du système de conditionnement, contaminants introduits pendant la fabrication, le conditionnement ou d'autres processus externes. Cela rend la détection et la quantification des particules particulièrement importantes, ce qui est précisément l'objectif de la norme USP 788. 

Deux méthodes pour les particules en suspension dans les injections selon la norme USP 788 

La norme USP 788 spécifie deux méthodes pour déterminer les particules en suspension : Méthode 1 – Test de comptage des particules par obscurcissement de la lumière et Méthode 2 – Test de comptage des particules au microscope.¹ 

Le compteur de particules à obscurcissement de lumière (LO) est un instrument qui utilise une source lumineuse et un détecteur pour déterminer la taille et la concentration des particules en suspension dans un échantillon spécifique.

L'instrument mesure le degré d'obstruction de la lumière causé par des particules individuelles en faisant passer l'échantillon à travers une ouverture étroite. 

L'obscurcissement de la lumière est une méthode couramment utilisée pour quantifier les particules dans les plages de taille ≥ 10 µm et ≥ 25 µm, bien qu'elle permette également de mesurer des particules aussi petites que 2 µm. Cependant, cette technique a ses limites. Elle présente des difficultés pour compter avec précision les particules dans les formulations à haute viscosité et rencontre des problèmes pour évaluer les informations morphologiques des particules.^{2 Souvent}, les particules transparentes et non sphériques n'obscurcissent pas suffisamment la lumière et sont donc fréquemment sous-estimées par cette méthode^.2

La nécessité d'améliorer les technologies d'analyse et de test des particules 

Compte tenu de l'importance cruciale du développement de produits thérapeutiques, il est essentiel de comprendre et de contrôler la stabilité physique à toutes les étapes du processus de fabrication. Les fabricants ne peuvent pas se contenter de respecter les normes minimales lors de la mise sur le marché d'un médicament : les particules doivent être entièrement caractérisées à chaque étape. 

Pour y parvenir, les chercheurs ont besoin des outils les plus efficaces pour surveiller les niveaux de particules afin de démontrer le contrôle et la sécurité. Bien quela norme USP 788 recommanded'utiliser des techniques d'obscurcissement de la lumière et un test de comptage microscopique des particules pour l'analyse des particules (méthode USP 788 2), le recours à l'obscurcissement de la lumière seul ne suffit pas à fournir une image globale, en particulier pour les formulations à haute viscosité ou la contamination par des particules extrinsèques. 

Cela nécessite une solution capable de fournir une technique précise et exacte pour caractériser les particules invisibles ainsi que les contaminants. 

Imagerie par membrane en arrière-plan : une révolution pour la génération de données conformes à la norme USP 788 

Backgrounded Membrane Imaging (BMI), une technique d'imagerie à contraste élevé, génère des données précises sur les particules subvisibles (SVP) conformes à la norme USP 788. 

Cette technique a été développée sur le Aura System, le premier système qui permet de tester les particules dès les premières étapes du développement et plus tard lors du contrôle qualité. Grâce au système Aura, vous pouvez déterminer si une particule provient du médicament lui-même, d'un ingrédient présent dans le liquide qui s'est séparé de la solution, d'un contaminant externe ou même d'une cellule. 

BMI réinvente l'imagerie membranaire grâce à la robotique moderne, au traitement d'images et à une optique novatrice dans un format de plaque filtrante à 96 puits qui fonctionne comme un lecteur de plaques. Elle est également insensible à l'indice de réfraction de la solution, ce qui permet une mesure fiable des agrégats protéiques translucides. 

Utilisation d'Aura pour un comptage efficace des particules conformément à la méthode 2 de l'USP 788 

Conformément aux directives USP 788 Méthode 2, nous avons développé un protocole efficace et précis de comptage des particules pour les tests de libération des lots à l'aide du système Aura. 

Avec notre méthode à haut débit, le prélavage, la mise en arrière-plan de la membrane, la filtration de l'échantillon et le lavage de la membrane après filtration sont des étapes nécessaires pour réussir un test en un temps réduit par rapport aux méthodes traditionnelles. L'efficacité est encore accrue lorsqu'elle est combinée à des manipulateurs robotisés, grâce à la compatibilité de la plaque avec les robots, pour vous donner des résultats encore plus rapides. 

Les procédures de lavage des membranes recommandées par l'USP 788 présentent un avantage considérable : elles augmentent la fiabilité du comptage des particules. Une fois l'échantillon appliqué sur la membrane, toute matière soluble susceptible de brouiller les résultats, telle que les protéines et les cristaux de sel, est éliminée à l'aide d'eau ultra-pure. Et comme le système Aura peut effectuer plusieurs mesures, toutes les mesures d'analyse peuvent être validées plus facilement, ce qui renforce encore la confiance dans leur précision. 

Conclusion 

Aura Systems générer des données précises sur les particules subvisibles conformes à la norme USP 788, complétant parfaitement l'obscurcissement de la lumière afin que les fabricants de médicaments aient une couverture complète de toutes les particules d'intérêt. 

En abandonnant les techniques obsolètes, vous avez le pouvoir de prendre des décisions plus intelligentes plus rapidement, garantissant ainsi que les traitements thérapeutiques essentiels soient développés de manière plus sûre et plus rapide afin d'aider les patients qui en ont besoin. 

Références

1. https://www.uspnf.com/sites/default/files/usp_pdf/EN/USPNF/revisionGeneralChapter788.pdf 

2. https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0378517320300569 

3. https://www.uspnf.com/sites/default/files/usp_pdf/EN/USPNF/revisions/gc_1_rb_notice.pdf