Soluciones de ácidos nucleicos

Soluciones de ácidos nucleicos

Obtenga de forma exhaustiva mediciones indicativas de pureza, identidad, potencia y seguridad para ácidos nucleicos de cadena larga (ARNm, ADNmc, ADN) mediante robustas herramientas y técnicas de Waters preparadas para el cumplimiento normativo y fáciles de implementar.

Obtenga de forma exhaustiva mediciones indicativas de pureza, identidad, potencia y seguridad para ácidos nucleicos de cadena larga (ARNm, ADNmc, ADN) mediante robustas herramientas y técnicas de Waters preparadas para el cumplimiento normativo y fáciles de implementar.

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Descripción general

Las secuencias de transgenes/ácidos nucleicos de cadena larga en las terapias celulares y génicas oscilan en longitud entre 500 y 10 000 nucleótidos o más. Confirmar su identidad y pureza es de vital importancia para garantizar la seguridad y la eficacia de estas nuevas modalidades. Las columnas y los sistemas cromatográficos de Waters, combinados con la detección óptica o la espectrometría de masas, proporcionan potentes capacidades para confirmar las propiedades fisicoquímicas de estos ácidos nucleicos y de su producto farmacéutico completamente montado cuando se empaquetan en nanopartículas lipídicas (LNP), vectores virales (p. ej., AAV) o partículas similares a virus (VLP) para la administración celular.


Aplicaciones

Para garantizar la estabilidad, la eficacia y la seguridad de las terapias celulares y génicas, es de vital importancia evaluar la integridad, la heterogeneidad y la pureza de sus cargas de ácido nucleico, ya sea en forma de ARNm, ADN monocatenario (ADNmc) o ADN bicatenario (ADNbc). La cromatografía, en combinación con la dispersión de luz o la espectrometría de masas, es una técnica eficaz para medir estos atributos de calidad críticos.

Para garantizar la estabilidad, la eficacia y la seguridad de las terapias celulares y génicas, es de vital importancia evaluar la integridad, la heterogeneidad y la pureza de sus cargas de ácido nucleico, ya sea en forma de ARNm, ADN monocatenario (ADNmc) o ADN bicatenario (ADNbc). La cromatografía, en combinación con la dispersión de luz o la espectrometría de masas, es una técnica eficaz para medir estos atributos de calidad críticos.


Notas de aplicación

Notas de aplicación

La concentración de un producto terapéutico basado en ácidos nucleicos debe determinarse con exactitud para garantizar la dosificación adecuada y resultados terapéuticos consistentes en diferentes lotes del producto farmacéutico. La cromatografía de fase reversa y las separaciones de intercambio aniónico se pueden aplicar de forma eficaz para este fin.

La concentración de un producto terapéutico basado en ácidos nucleicos debe determinarse con exactitud para garantizar la dosificación adecuada y resultados terapéuticos consistentes en diferentes lotes del producto farmacéutico. La cromatografía de fase reversa y las separaciones de intercambio aniónico se pueden aplicar de forma eficaz para este fin.


Notas de aplicación

Notas de aplicación

El análisis de la caperuza en 5', el análisis de la cola en 3' de poli A y el mapeo de oligonucleótidos para la confirmación de la secuencia y la modificación son cruciales para verificar la integridad, la eficacia de la traducción y la estabilidad del ARNm. Estos atributos están directamente relacionados con el rendimiento clínico y la seguridad. Los análisis avanzados de Waters integran el uso de enzimas de digestión precisas y flujos de trabajo de software de rutina para mejorar el análisis de ARN, asegurando una evaluación del ARNm completa y fiable.

El análisis de la caperuza en 5', el análisis de la cola en 3' de poli A y el mapeo de oligonucleótidos para la confirmación de la secuencia y la modificación son cruciales para verificar la integridad, la eficacia de la traducción y la estabilidad del ARNm. Estos atributos están directamente relacionados con el rendimiento clínico y la seguridad. Los análisis avanzados de Waters integran el uso de enzimas de digestión precisas y flujos de trabajo de software de rutina para mejorar el análisis de ARN, asegurando una evaluación del ARNm completa y fiable.


Notas de aplicación

Notas de aplicación

Los plásmidos expresados de forma recombinante son materias primas esenciales para la producción de vectores virales y para las reacciones de transcripción in vitro (IVT) utilizadas para fabricar ARNm. En las aplicaciones IVT, es fundamental confirmar la linealización completa y exacta del plásmido, ya que las formas residuales superenrolladas o circulares abiertas pueden provocar la terminación prematura de la transcripción y productos de ARNm heterogéneos. El análisis de la topología del plásmido para determinar la eficacia de la linealización antes del bioprocesamiento posterior garantiza la integridad y la eficacia del principio activo de ARNm resultante.

Los plásmidos expresados de forma recombinante son materias primas esenciales para la producción de vectores virales y para las reacciones de transcripción in vitro (IVT) utilizadas para fabricar ARNm. En las aplicaciones IVT, es fundamental confirmar la linealización completa y exacta del plásmido, ya que las formas residuales superenrolladas o circulares abiertas pueden provocar la terminación prematura de la transcripción y productos de ARNm heterogéneos. El análisis de la topología del plásmido para determinar la eficacia de la linealización antes del bioprocesamiento posterior garantiza la integridad y la eficacia del principio activo de ARNm resultante.


Notas de aplicación

Notas de aplicación


Seminario online a demanda: Análisis de LC-MS CQA de productos terapéuticos de ARN

En este seminario online, se presentan flujos de trabajo analíticos para el análisis de ARN CQA con datos adquiridos en nuestra plataforma waters_connect preparada para el cumplimiento normativo. Las aplicaciones demostradas incluyen la caracterización de moléculas tanto de ARNsg (ID y fidelidad estructural) como de ARNm (ID, fidelidad estructural, caperuza en 5', asimetría de poli-A en 3').

En este seminario online, se presentan flujos de trabajo analíticos para el análisis de ARN CQA con datos adquiridos en nuestra plataforma waters_connect preparada para el cumplimiento normativo. Las aplicaciones demostradas incluyen la caracterización de moléculas tanto de ARNsg (ID y fidelidad estructural) como de ARNm (ID, fidelidad estructural, caperuza en 5', asimetría de poli-A en 3').


Elearning concept background

Soluciones


Los sistemas LC y LC-MS de Waters ofrecen un rendimiento de separaciones y una sensibilidad líderes para el análisis de ácidos nucleicos.

Adsorción ultrabaja para una sensibilidad y reproducibilidad máximas

Adsorción ultrabaja para una sensibilidad y reproducibilidad máximas

Los sistemas y columnas MaxPeak Premier eliminan la imprevisibilidad de las pérdidas de analitos debidas a interacciones con metales, que pueden ser especialmente pronunciadas con los ácidos nucleicos cargados negativamente.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Confirmación y monitorización eficaces de los atributos de calidad críticos del ARN durante todo el desarrollo y la fabricación

Confirmación y monitorización eficaces de los atributos de calidad críticos del ARN durante todo el desarrollo y la fabricación

Posibilite análisis biofarmacéuticos de LC-MS de rutina en todos los laboratorios con el sistema de LC-MS BioAccord de Waters, que combina la confianza de los datos de masa exacta y las aplicaciones de waters_connect para el análisis de datos y la generación de informes listos para el cumplimiento normativo.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Sequence and Modification Confirmation

Rendimiento excepcional, sin comprometer la caracterización y monitorización de atributos de ARN

Rendimiento excepcional, sin comprometer la caracterización y monitorización de atributos de ARN

Identifique y monitoree con confianza los atributos de calidad del ARN con Xevo MRT en waters_connect. La exactitud de masa inferior a ppm, la fragmentación eficaz, la resolución a masa alta y las potentes capacidades cuantitativas mejoran tanto la exactitud como la productividad del laboratorio.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Cobertura completa de alta resolución para una caracterización y monitorización fiables del ARN

Cobertura completa de alta resolución para una caracterización y monitorización fiables del ARN

Acelere la caracterización de ácidos nucleicos con el sistema de sobremesa HRMS de alto rendimiento Xevo G3 QTof y convierta ese conocimiento en ensayos de monitorización eficientes, que proporcionen resultados cualitativos y cuantitativos exactos con el intercambio de datos a través de las redes de waters_connect.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Sequence and Modification Confirmation

Obtenga información sobre la estabilidad de los ácidos nucleicos

Obtenga información sobre la estabilidad de los ácidos nucleicos

Obtenga mediciones simultáneas del tamaño, el peso molecular, la distribución y la morfología con el detector Wyatt DAWN MALS flexible, acoplado a los sistemas de cromatografía líquida de Waters, incluido el sistema Arc Premier, que se puede aplicar a ácidos nucleicos, LNP y proteínas conjugadas.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Caracterización de partículas de terapia génica de pequeño volumen

Caracterización de partículas de terapia génica de pequeño volumen

Obtenga información sin precedentes sobre el desarrollo de la terapia génica con Aura GT. Solo se necesitan 5 µL de muestra para evaluar la agregación y la fuga de ácidos nucleicos en una amplia gama de modalidades de administración de genes, incluidas AAV, LVV y LNP, para poder identificar problemas de estabilidad de forma temprana y garantizar la calidad del producto.

  • Integrity and Aggregate Analysis

Software basado en aplicaciones preparado para el cumplimiento normativo y con conexión en red para optimizar la adquisición de datos, el procesamiento y la generación de informes de datos de LC-MS.

Flujos de trabajo informáticos de ARN especialmente diseñados

Flujos de trabajo informáticos de ARN especialmente diseñados

Acelere el proceso desde el análisis de muestras hasta la toma de decisiones con las aplicaciones MAP Sequence, CONFIRM Sequence e INTACT Mass, preparadas para el cumplimiento normativo, con el fin de comprender en su totalidad los productos de ácidos nucleicos.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Sequence and Modification Confirmation

Columnas y estándares analíticos que ofrecen un rendimiento de vanguardia en LC y LC-MS para ácidos nucleicos

Columnas de RPLC para una resolución, reproducibilidad y estabilidad excepcionales

Columnas de RPLC para una resolución, reproducibilidad y estabilidad excepcionales

Obtenga una excepcional resolución, sensibilidad y estabilidad en fase reversa con par iónico (IP-RP) con las columnas de MaxPeak Premier Oligonucleotide BEH C18 de Waters que se han sometido a pruebas de control de calidad (QC) con el patrón para oligonucleótidos MassPrep de Waters para garantizar la reproducibilidad entre lotes.

  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation

Columnas SEC inertes de alta eficacia y poro ancho

Columnas SEC inertes de alta eficacia y poro ancho

Consiga una separación intacta de los ácidos nucleicos de cadena larga, incluido el ARNm y su producto farmacéutico completamente envasado, con las columnas GTxResolve SEC de 450 Å, 1000 Å y 2000 Å de Waters que separan los ácidos nucleicos y los productos farmacéuticos ensamblados en función del tamaño y la forma, lo que permite la cuantificación de la carga útil, la integridad del producto y los análisis de pureza.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Selectividades ortogonales y cromatografía sin par iónico

Selectividades ortogonales y cromatografía sin par iónico

Obtenga opciones de LC sin par iónico y de selectividad ortogonal con las columnas para productos de terapia génica (GTx) de Waters, incluidas las columnas de intercambio aniónico fuerte y débil, y las columnas HILIC con partículas BEH unidas a amida para una variedad de nuevas opciones de método.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Realice métodos de idoneidad del sistema y de referencia con confianza

Realice métodos de idoneidad del sistema y de referencia con confianza

Elimine la necesidad de preparar mezclas complejas con los patrones de oligonucleótidos y ácidos nucleicos con lote certificado y en paquete de Waters, que ofrecen facilidad de uso y tranquilidad a la hora de realizar o solucionar problemas importantes de ensayos basados​en separaciones.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Digestión de ARN con especificidades de escisión únicas

Digestión de ARN con especificidades de escisión únicas

Observe una cobertura de la secuencia tres veces mayor y productos de digestión de ARN más largos con masas únicas para el análisis de LC-MS. Las ribonucleasas RapiZyme ofrecen propiedades de escisión complementarias y productos de digestión superpuestos para mejorar la confianza en la identificación.

  • Sequence and Modification Confirmation

Para ácidos nucleicos de cadena larga

Para ácidos nucleicos de cadena larga

Evite analizar geles, ahorre mucho tiempo y obtenga una mayor eficacia al confirmar la longitud del plásmido y determinar la eficacia de la linealización: un cambio radical para los laboratorios de transcripción in vitro (IVT).

  • Plasmid Topology and Purity Analysis

 Está a solo un clic de conseguir el éxito

 Está a solo un clic de conseguir el éxito

Optimice la productividad y el éxito de su laboratorio con Waters Global Services para mantener el máximo rendimiento del sistema, minimizar el tiempo de inactividad, abordar los desafíos de las aplicaciones y cumplir con los estrictos requisitos de cumplimiento normativo.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Haga que la ciencia sea más accesible con Waters Capital

Haga que la ciencia sea más accesible con Waters Capital

Maximice los recursos y minimice el riesgo con las opciones de pago de Waters Capital, que incluyen la actualización de equipos obsoletos, la obtención de soporte personalizado y la combinación de servicios en un único pago mensual.

  • Integrity and Aggregate Analysis
  • Concentration Determining Assays
  • Sequence and Modification Confirmation
  • Plasmid Topology and Purity Analysis

Los datos hablan por sí solos

Los datos hablan por sí solos
rapizyme-cusativin-digest-of-sgRNA

Análisis LC-UV-MS del sgRNA de HPRT digerido con RapiZyme Cusativin recombinante. Se utilizaron tres lotes de enzimas recombinantes independientes de RapiZyme Cusativin para digerir el sgRNA de HPRT. Los tres cromatogramas UV (trazos negros, azules y rojos) se superponen, lo cual indica el comportamiento de digestión altamente reproducible.

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Efecto de la temperatura en el perfil cromatográfico (selectividad) y el arrastre. Columna: Columna Gen-Pak FAX de 100 x 4,6 mm, 2,5 µm, fase móvil A: TRIS 25 mM, pH = 7,6, fase móvil B: TRIS 25 mM, pH = 7,6 + NaBr 2 M, F = 0,6 mL/min, gradiente: 12-35 % B en 15 min (gradiente superficial), tapón de eluyente de modulador: fase móvil B. Inyección de soportes: 1 µL de tapón previo del modulador + 2 µL de muestra + 1 µL de tapón posterior del modulador. Temperatura: Ambiente (izquierda), 35 °C (centro) y 45 °C (derecha).

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Caracterización de diferentes formas de oligonucleótidos con caperuza en 5' en la digestión con RNasa MC1 de ARNm 1, con caperuza (a), con caperuza no metilada (b) y sin caperuza (c).

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Efecto del pH y la temperatura en la separación de isoformas plasmídicas ΦX174.


Seminarios web y recursos


  • Folleto

Monitorización de atributos de rutina del ARN: Decisiones permitidas para una calidad consistente del producto

Monitorización de atributos de rutina del ARN: Decisiones permitidas para una calidad consistente del producto
  • eBook

Libro electrónico: Characterizing LNP mRNA Consumables

Libro electrónico: Characterizing LNP mRNA Consumables
  • Póster

Caracterización de ARNm intacto mediante el uso de espectrometría de masas de tiempo de vuelo en fase reversa con intercambio de iones, cromatografía de exclusión de tamaño con dispersión de luz en varios ángulos y espectrometría de masas con detección de carga

Caracterización de ARNm intacto mediante el uso de espectrometría de masas de tiempo de vuelo en fase reversa con intercambio de iones, cromatografía de exclusión de tamaño con dispersión de luz en varios ángulos y espectrometría de masas con detección de carga
  • Seminario online

LC-MS for RNA Therapeutics to Ensure Product Quality and Process Consistency

LC-MS for RNA Therapeutics to Ensure Product Quality and Process Consistency
  • Seminario online

Presentación de conocimientos de CQA para ARNm, LNP y vectores virales por SEC y MALS con columnas Novel de partículas de poro ultraancho de 1000 Å

Presentación de conocimientos de CQA para ARNm, LNP y vectores virales por SEC y MALS con columnas Novel de partículas de poro ultraancho de 1000 Å
  • Seminario online

New Insights on Anion Exchange and Size Exclusion of Nucleic Acids

New Insights on Anion Exchange and Size Exclusion of Nucleic Acids
  • Seminario online

Mapeo de ARN: una exploración de LC-MS, BioSpring

Mapeo de ARN: una exploración de LC-MS, BioSpring
  • Seminario online

Descifrado del código: análisis de ARNm y ARNg con enzimas avanzadas, espectrometría de masas e informática

Descifrado del código: análisis de ARNm y ARNg con enzimas avanzadas, espectrometría de masas e informática
  • Infografía

Flujos de trabajo de monitorización de atributos para productos terapéuticos de ácidos nucleicos

Flujos de trabajo de monitorización de atributos para productos terapéuticos de ácidos nucleicos


Obtenga más información sobre las soluciones de ácidos nucleicos.

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