Las secuencias de transgenes/ácidos nucleicos de cadena larga en las terapias celulares y génicas oscilan en longitud entre 500 y 10 000 nucleótidos o más. Confirmar su identidad y pureza es de vital importancia para garantizar la seguridad y la eficacia de estas nuevas modalidades. Las columnas y los sistemas cromatográficos de Waters, combinados con la detección óptica o la espectrometría de masas, proporcionan potentes capacidades para confirmar las propiedades fisicoquímicas de estos ácidos nucleicos y de su producto farmacéutico completamente montado cuando se empaquetan en nanopartículas lipídicas (LNP), vectores virales (p. ej., AAV) o partículas similares a virus (VLP) para la administración celular.
Seminario online a demanda: Análisis de LC-MS CQA de productos terapéuticos de ARN
Software basado en aplicaciones preparado para el cumplimiento normativo y con conexión en red para optimizar la adquisición de datos, el procesamiento y la generación de informes de datos de LC-MS.
Acelere el proceso desde el análisis de muestras hasta la toma de decisiones con las aplicaciones MAP Sequence, CONFIRM Sequence e INTACT Mass, preparadas para el cumplimiento normativo, con el fin de comprender en su totalidad los productos de ácidos nucleicos.
Columnas y estándares analíticos que ofrecen un rendimiento de vanguardia en LC y LC-MS para ácidos nucleicos
Obtenga una excepcional resolución, sensibilidad y estabilidad en fase reversa con par iónico (IP-RP) con las columnas de MaxPeak Premier Oligonucleotide BEH C18 de Waters que se han sometido a pruebas de control de calidad (QC) con el patrón para oligonucleótidos MassPrep de Waters para garantizar la reproducibilidad entre lotes.
Consiga una separación intacta de los ácidos nucleicos de cadena larga, incluido el ARNm y su producto farmacéutico completamente envasado, con las columnas GTxResolve SEC de 450 Å, 1000 Å y 2000 Å de Waters que separan los ácidos nucleicos y los productos farmacéuticos ensamblados en función del tamaño y la forma, lo que permite la cuantificación de la carga útil, la integridad del producto y los análisis de pureza.
Obtenga opciones de LC sin par iónico y de selectividad ortogonal con las columnas para productos de terapia génica (GTx) de Waters, incluidas las columnas de intercambio aniónico fuerte y débil, y las columnas HILIC con partículas BEH unidas a amida para una variedad de nuevas opciones de método.
Elimine la necesidad de preparar mezclas complejas con los patrones de oligonucleótidos y ácidos nucleicos con lote certificado y en paquete de Waters, que ofrecen facilidad de uso y tranquilidad a la hora de realizar o solucionar problemas importantes de ensayos basadosen separaciones.
Observe una cobertura de la secuencia tres veces mayor y productos de digestión de ARN más largos con masas únicas para el análisis de LC-MS. Las ribonucleasas RapiZyme ofrecen propiedades de escisión complementarias y productos de digestión superpuestos para mejorar la confianza en la identificación.
Evite analizar geles, ahorre mucho tiempo y obtenga una mayor eficacia al confirmar la longitud del plásmido y determinar la eficacia de la linealización: un cambio radical para los laboratorios de transcripción in vitro (IVT).
Optimice la productividad y el éxito de su laboratorio con Waters Global Services para mantener el máximo rendimiento del sistema, minimizar el tiempo de inactividad, abordar los desafíos de las aplicaciones y cumplir con los estrictos requisitos de cumplimiento normativo.
Maximice los recursos y minimice el riesgo con las opciones de pago de Waters Capital, que incluyen la actualización de equipos obsoletos, la obtención de soporte personalizado y la combinación de servicios en un único pago mensual.
Análisis LC-UV-MS del sgRNA de HPRT digerido con RapiZyme Cusativin recombinante. Se utilizaron tres lotes de enzimas recombinantes independientes de RapiZyme Cusativin para digerir el sgRNA de HPRT. Los tres cromatogramas UV (trazos negros, azules y rojos) se superponen, lo cual indica el comportamiento de digestión altamente reproducible.
Efecto de la temperatura en el perfil cromatográfico (selectividad) y el arrastre. Columna: Columna Gen-Pak FAX de 100 x 4,6 mm, 2,5 µm, fase móvil A: TRIS 25 mM, pH = 7,6, fase móvil B: TRIS 25 mM, pH = 7,6 + NaBr 2 M, F = 0,6 mL/min, gradiente: 12-35 % B en 15 min (gradiente superficial), tapón de eluyente de modulador: fase móvil B. Inyección de soportes: 1 µL de tapón previo del modulador + 2 µL de muestra + 1 µL de tapón posterior del modulador. Temperatura: Ambiente (izquierda), 35 °C (centro) y 45 °C (derecha).
Caracterización de diferentes formas de oligonucleótidos con caperuza en 5' en la digestión con RNasa MC1 de ARNm 1, con caperuza (a), con caperuza no metilada (b) y sin caperuza (c).
Efecto del pH y la temperatura en la separación de isoformas plasmídicas ΦX174.