Columnas GTxResolve SEC
Acelere los primeros análisis de investigación, desarrollo y liberación de principios activos y medicamentos GTx
Con la cromatografía de exclusión por tamaño (SEC), los analistas pueden evaluar rápidamente el contenido agregado, la integridad, la heterogeneidad y la pureza de los principios activos de terapia génica. Las columnas GTxResolve SEC de Waters incorporan tecnologías químicas innovadoras para el análisis rápido de analitos biológicos grandes y varios ensayos de cuantificación de múltiples atributos, los primeros en su tipo.
Alcance nuevos puntos de referencia en calidad con las robustas columnas GTxResolve SEC de alta resolución y baja adsorción para nanopartículas de lípidos (LNP), plásmidos, ácidos nucleicos y análisis de vectores virales, incluidos lentivirus (LV), adenovirus (AdV) y virus adenoasociados (AAV).
- Acelerar el análisis de variantes de tamaños y agregados con alta resolución que permite la detección de impurezas de bajo nivel
- Proporcionar los datos reproducibles necesarios para los métodos de la plataforma
- Mejorar el ahorro de coste con columnas que mantienen una larga duración
- Lograr una interacción secundaria baja que permita un ruido MALS bajo
- Proporcionar el hardware de baja adsorción necesario con los productos biológicos para mejorar la recuperación
Columnas GTxResolve SEC
Especificaciones
Descripción general
- Admita diferentes etapas de desarrollo de fármacos con métodos de plataforma SEC rentables, reproducibles y robustos
- Obtenga una resolución más alta, esencial para el análisis de variantes de tamaño y la detección de impurezas de bajo nivel
- Alcance nuevos niveles de reproducibilidad de separación con columnas de control de calidad probadas por lotes y un uso pionero en la industria de pruebas combinadas de proteínas y ácidos nucleicos para garantizar la detección de cualquier carga útil liberada y transgén libre
- Logre una recuperación suficiente con hardware de baja adsorción y materiales de relleno inertes que reducen la necesidad de inyecciones de muestras de gran volumen
- Obtenga valiosas mediciones de múltiples atributos como la distribución de tamaños, la masa molar, la conformación de los agregados y el título absoluto cuando se combina con detectores de aplicación universal, como los detectores de dispersión de luz multiángulo (MALS)
- Logre interacciones secundarias más bajas para dar soporte al desarrollo de métodos de plataforma con nuevos materiales de relleno y química de superficie
Uso recomendado: Para analizar variantes de agregados/tamaños de principios activos y medicamentos de terapia génica.
Características de las columnas GTx
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Analitos de 100-500 Å de diámetro -
Partículas de BEH a diol de 2,5 µm
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Hardware HPS MaxPeak
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Acondicionamiento rápido y bajo ruido MALS
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Analitos de 200-800 Å de diámetro
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Partículas de OH-PEO con enlaces cruzados con puente de etileno de 3 µm
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Hardware HPS MaxPeak
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Acondicionamiento rápido y bajo ruido MALS
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Analitos de 800-2500 Å de diámetro
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Partículas de OH-PEO con enlaces cruzados con puente de etileno de 3 µm
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Hardware HPS MaxPeak
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Acondicionamiento rápido y bajo ruido MALS
Cuantificación de múltiples atributos en plataforma con SEC-MALS
El virus adenoasociado (AAV) y otros vectores virales son modalidades prometedoras para el tratamiento de enfermedades raras. Para garantizar la seguridad y la eficacia de estos fármacos, es necesario medir el contenido del fármaco y el nivel de impurezas. La SEC es una técnica de separación prometedora para evaluar la cantidad de los diferentes componentes de la muestra.
Esta aplicación demuestra la evaluación de las rutas de degradación de un AAV utilizando una nueva y robusta química de superficie de partículas. Las interacciones secundarias más bajas y la alta eficacia de la columna GTxResolve SEC de 1000 Å y GTxResolve Premier BEH SEC de 450 Å facilitan y aclaran nuevos conocimientos sobre el diseño de fármacos y, por lo tanto, se pueden utilizar como una herramienta adecuada como punto de partida para los métodos de plataforma.
Análisis de integridad para ácidos nucleicos de pequeños a grandes
Los estudios de integridad en los que intervienen ácidos nucleicos grandes, como el ARNm, pueden beneficiarse de un análisis de exclusión por tamaño rápido. La SEC con una columna GTxResolve Premier SEC de 1000 Å permite lograr separaciones de alta eficacia y evaluar rápidamente la integridad y la estabilidad de los ácidos nucleicos más grandes. En esta aplicación, la columna GTxResolve Premier SEC 1000 se combina con la detección MALS, lo que demuestra la utilidad de la SEC de poro ancho para la caracterización de atributos biofísicos.
Heterogeneidad de LNP con tecnología de poro ancho
Las nanopartículas de lípidos (LNP) son transportadoras críticas para la entrega de ARNm en vacunas y terapias génicas. Esta aplicación utiliza la columna GTxResolve SEC de 2000 Å de Waters con partículas MaxPeak Premier de 3 µm para comparar la heterogeneidad de las formulaciones de LNP de dos fabricantes diferentes. El cromatograma revela distintos perfiles de elución: el fabricante 1 muestra un pico estrecho y simétrico, lo que indica una población de LNP relativamente homogénea. El fabricante 2 presenta un perfil de elución más amplio con hombros adicionales y picos secundarios, lo que sugiere una formulación más heterogénea con tamaños de partículas más grandes. La capacidad de perfilar tales diferencias resalta la sensibilidad y el poder de resolución de la columna, lo que respalda su uso tanto en el desarrollo como en el control de calidad de productos terapéuticos basados en LNP.
Resolución de plásmidos y vectores
La caracterización de los compuestos terapéuticos de ácidos nucleicos requiere herramientas precisas capaces de resolver especies de ADN estrechamente relacionadas. Esto es especialmente importante en aplicaciones en las que el tamaño y la topología influyen directamente en la potencia, la eficacia de la transfección y el cumplimiento normativo. Aquí, demostramos la separación de alta resolución de dos especies de ADN circular con estructuras similares. Estas moléculas son difíciles de separar con columnas SEC convencionales y, en este ejemplo, la columna GTxResolve SEC de 2000 Å de Waters logra la resolución de la línea base, especialmente entre pBR322 y sus especies relacionadas, como se resalta en la región marcada con un círculo, y distingue claramente entre las dos construcciones de ADN.
Caracterización del tamaño de un vector lentiviral intacto (LVV)
Los lentivirus (LV) son un tipo de retrovirus ampliamente utilizado como vectores en la terapia génica, la terapia celular (como CAR-T) y el desarrollo de vacunas. Lo que los hace particularmente valiosos es su capacidad para integrar de forma estable el material genético tanto en células en división como en células que no se dividen, lo que permite la expresión a largo plazo de genes terapéuticos. La caracterización de LV es fundamental para garantizar su potencia, pureza y seguridad. Proporciona información clave sobre la integridad, la concentración y la agregación de las partículas, fundamentales para desarrollar una terapia génica robusta, escalable y que cumpla con las normativas. Aquí se demuestra la separación de una muestra de LV procesada posteriormente (Rt 12 min) de otras proteínas fragmentadas (Rt 14-15,5) generadas durante el procesamiento utilizando la columna GTxResolve SEC de 2000 Å de Waters, MaxPeak de 3 µm.
Estudio de estabilidad e integridad de fármacos para vacunas basadas en ARNm-LNP
Los científicos deben monitorizar la integridad y la estabilidad de un fármaco debido a las implicaciones en la seguridad y la eficacia. La reproducibilidad, la pureza, la especificidad y el intervalo lineal son algunos de los atributos de calidad críticos que se tienen en cuenta para las vacunas basadas en ARNm. La cromatografía de exclusión por tamaño es una técnica adecuada para la caracterización de agregados de LNP y ARNm más grandes en vacunas basadas en ácidos nucleicos. Se investigó la consistencia del contenido de nanopartículas de lípidos (LNP) y la respuesta lineal de dos formulaciones de LNP (X1 y X2) de dos fabricantes diferentes utilizando GTxResolve Premier SEC 1000 Å. En las aplicaciones de ejemplo, la respuesta lineal se mide trazando el área del pico frente a la cantidad de LNP inyectada en la columna GTxResolve Premier SEC 1000.
Lo que dicen los clientes...
«Nos entusiasmó probar la columna GTxResolve SEC de 2000Ä de Waters y aplicarla a las pruebas de pureza de los vectores lentivirales (LVV). Rápidamente obtuvimos nuevos conocimientos al resolver las impurezas relacionadas con el proceso al mismo tiempo que demostrábamos que el método podía producir altas recuperaciones de LVV intactos. Además, la aplicación de la columna a las pruebas de pureza de los plásmidos ha sido una grata sorpresa. Por primera vez, podemos establecer una técnica analítica de plataforma para comprobar la calidad de las materias primas y guiar a nuestros equipos de desarrollo de procesos hacia principios activos más puros. Esto reducirá el número de ensayos, nos ahorrará tiempo y contribuirá a mejorar la precisión requerida en las guías ICH».
Kevin McManus, científico III de Desarrollo Analítico, Matica Biotechnology
