寡核苷酸治疗药物开发的复苏推动了临床前/临床研发管线的迅速扩张,这类在基因转录和翻译层面发挥作用的短链核酸药物,对于许多遗传性疾病和常见疾病都展现出巨大的潜力。
十多年来,沃特世始终引领着合成寡核苷酸表征、纯化及生物分析领域的先进工具与技术开发。凭借热忱、专注与决心,我们始终致力于帮助客户攻克棘手的分析难题。从创新性高性能色谱柱、样品前处理消耗品,到LC、MS与光散射仪器的系列产品;从合规软件、基于应用的工作流程,到优质的服务与支持——我们随时准备助力您达成合成寡核苷酸开发目标。
案例研究:BioSpring采用沃特世寡核苷酸LC-MS工作流程扩展现有产品组合
借助waters_connect生物制药分析软件平台,加速从样品分析到决策的流程。这款合规、可联网的数据采集、分析与报告平台,支持在研发和生产实验室中部署LC-MS方法,还提供用于完整质量数分析、寡核苷酸与mRNA序列确认、工艺监测、定量分析等的内置应用程序。
用户可以在Empower CDS中构建MS谱库,匹配在不同项目和不同条件下采集的样品的谱峰。筛选选项可提高谱图匹配的准确度。
这些色谱柱借助硅胶基质颗粒提供优异的pH和温度耐受性,并采用MaxPeak Premier表面技术实现超低的非特异性吸附,可为寡核苷酸分析提供出色的离子对反相(IP-RP)分离度、灵敏度和稳定性。每批吸附剂都使用Waters MassPREP寡核苷酸标准品进行QC测试,确保出色的批次间重现性。
OligoWorks SPE试剂盒通过无需清洁剂、兼容MS且支持自动化的工作流程实现高回收率——既能节省时间、减少方法开发成本,又能凭借可靠且经QC测试的性能提升实验室效率。
沃特世预包装、批次认证的寡核苷酸标准品无需制备复杂混合物,简单易用,让您安心无忧地运行寡核苷酸分离。
沃特世的MS级IonHance HFIP是一种高纯度、兼容LC-MS的试剂,可实现超低的钠加合物和钾加合物形成率,为寡核苷酸的IP-RP LC-MS分析提供所需性能和可信度。该产品现已推出10 mL和100 mL两种规格。
亲水作用色谱(HILIC)是一种无需使用无离子对试剂的LC方法,为寡核苷酸分析提供了正交选择性。
沃特世寡核苷酸制备柱支持从分析柱直接放大,且能实现高回收率的高通量纯化。每批吸附剂均采用沃特世寡核苷酸标准品开展QC测试与筛选,以确保性能一致性与重现性。为尽可能提高灵活性,色谱柱提供MaxPeak Premier和不锈钢材质两种选择。
利用经过验证的工作流程简化定量LC-MS分析中从生物体液中萃取寡核苷酸的过程,有助于尽可能减小差异性、提高可追溯性并简化方法转换。
利用21-nt寡聚物测试ACQUITY Premier UPLC系统和ACQUITY Premier OST色谱柱的惰性:将最低可检测浓度(色谱柱上进样21 mer寡核苷酸0.5 nM或5 fmol)与前一空白进样的UV色谱图进行比较。
使用不锈钢色谱柱和常规系统(红色)、ACQUITY Premier色谱柱和常规系统(蓝色)以及ACQUITY Premier色谱柱和系统(紫色)得到的GEM91标准曲线。不同的斜率表明所测试的色谱柱和系统的回收率存在明显差异。
TUV和TIC色谱图,展示了BioAccord系统在1 μM OST标准品稀释100倍(上样量100 fmol)时的性能。五种主要寡核苷酸均在UV和TIC色谱图中清楚检出,表明该LC-MS系统和方法的灵敏度足以检出微量寡核苷酸杂质。
5’-UCGUCAAGCGAUUACAAGGTT-3’的ssRNA序列实现了LC-MS/MS全阶梯序列确认。实验以M4-峰为母离子。碎片离子峰匹配是使用简单的Excel文件计算与理论质量数匹配完成的。使用MaxEnt3对电荷进行去卷积和去同位素。