Spectrométrie de masse à détection de charge
Mesure directe sans précédent pour la caractérisation de biomolécules de masse élevée
Dans le domaine de la recherche, caractériser des molécules très massives à l’aide de méthodes conventionnelles peut fausser les résultats et limiter considérablement la compréhension de la biologie et des mécanismes pathologiques. De leur côté, les spécialistes du développement de procédés pharmaceutiques en amont, confrontés à de nouvelles modalités, doivent souvent recourir à des approches longues, coûteuses et itératives pour caractériser les grosses biomolécules.
La spectrométrie de masse à détection de charge (CDMS) permet de dépasser les limites des techniques conventionnelles en offrant une analyse directe de complexes intacts dont la masse atteint plusieurs mégadaltons. Grâce à la technologie CDMS, nous avons démontré la possibilité de mesurer et de caractériser directement, avec fidélité, exactitude et à haute cadence, des molécules très massives, telles que les médicaments génétiques, produits biothérapeutiques, vaccins et complexes protéiques. Nous avons également pu déterminer la masse moléculaire, la pureté et l’hétérogénéité de biomolécules dans la gamme du mégadalton et au-delà, le tout à l’aide d’un appareil compact de paillasse.
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Spectrométrie de masse à détection de charge
Présentation
- Mesurez directement les grosses molécules pour révéler leur état natif et mieux comprendre les subtilités de leurs fonctions biologiques.
- Analysez et caractérisez directement les modalités très massives de manière fidèle, exacte et à haute cadence, et ouvrez la voie à de nouvelles possibilités.
- Déterminez les voies biologiques impliquant des complexes protéiques tels que les protéasomes grâce à une caractérisation native.
- Développez rapidement et efficacement des thérapies à base d’ARNm et d’AAV en conformité avec la réglementation pour la détermination des attributs de qualité critiques (CQA).
- Affinez votre compréhension de l’efficacité et de l’innocuité des vecteurs viraux adéno-associés recombinants (rAAV) en mesurant avec exactitude le rapport vide/partiel/plein.
- Évaluez l’intégrité et l’hétérogénéité de l’ADN plasmidique utilisé dans les thérapies géniques.
- Caractérisez les particules pseudovirales (VLP) utilisées dans les vaccins, notamment contre le chikungunya ou l’hépatite B.
Utilisation recommandée : pour la mesure directe de biomédicaments dans la gamme du mégadalton et au-delà.
Caractérisation en routine des analytes à l’échelle du mégadalton et au-delà
Technique d’analyse pour les masses ultra-élevées, la CDMS repose sur la technologie ELIT (piège d’ions linéaire électrostatique) qui permet de mesurer directement des ions individuels en déterminant simultanément leur rapport masse/charge (m/z) et leur charge (z). Grâce à la CDMS, votre laboratoire peut déterminer avec exactitude la masse moléculaire et mettre en évidence l’hétérogénéité de vos échantillons. Les applications de la CDMS couvrent un large éventail de modalités, notamment la glutamate déshydrogénase, les plasmides d’ADN, les bactériophages, les capsides virales, les vaccins, les particules pseudovirales (VLP) et les nanoparticules.
Évaluation en routine et exacte de l’intégrité des produits rAAV
La CDMS avec ionisation par électrospray (ESI) peut être un outil puissant pour accélérer le développement de procédés et appuyer le contrôle qualité des rAAV. Elle permet de distinguer facilement et rapidement les particules vides, pleines et partiellement pleines des capsides rAAV, tout en fournissant une quantification relative. La CDMS peut également être utilisée pour identifier les sérotypes de rAAV et étudier les gènes d’intérêt par éjection du génome.
Mesure directe de la masse intacte de complexes protéiques, sans déconvolution
La technologie CDMS permet de mesurer directement de grands complexes protéiques, révélant leur état natif et offrant aux chercheurs une meilleure compréhension des mécanismes biologiques. Voici un exemple de mesure de la masse du 28-mère intact du protéasome 20S Core Particle (20S CP). La masse intacte du complexe a été mesurée directement (734 kDa) avec un écart inférieur à 2 % par rapport à la valeur rapportée dans la littérature.
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