Espectrometría de masas con detección de carga
Medición directa sin precedentes para la caracterización de biomoléculas de megamasa
Para quienes se dedican a la investigación científica, la caracterización de moléculas masivas con métodos convencionales puede ser engañosa y limitar fundamentalmente la comprensión de la biología y los mecanismos de las enfermedades. Mientras tanto, los responsables del desarrollo de procesos farmacéuticos upstream que trabajan con nuevas modalidades a menudo se ven obligados a recurrir a métodos de ensayo y error, tediosos y costosos, para caracterizar biomoléculas grandes.
La espectrometría de masas con detección de carga (CDMS) tiene el potencial de abordar las limitaciones de la espectrometría de masas convencional en la resolución de complejos de megamasa nativa intacta. Con la tecnología de CDMS, hemos demostrado la precisión, la exactitud y el alto rendimiento de la medición directa de masas y la caracterización de modalidades de megamasas, incluidos medicamentos genéticos, los productos bioterapéuticos, las vacunas y los complejos proteicos, así como la determinación del peso molecular, la pureza y la heterogeneidad de biomoléculas en el intervalo de megadaltons y más allá, todo ello desde un dispositivo de sobremesa.
¿Desea saber más? Explore el innovador trabajo de los científicos y colaboradores de Waters en la sección de recursos.
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Descripción general
- Mida moléculas grandes directamente para revelar sus estados nativos y comprender los matices de las funciones biológicas.
- Analice y caracterice directamente modalidades de megamasa con precisión, exactitud y rendimiento, lo que abrirá la puerta a nuevas posibilidades.
- Determine las vías biológicas que involucran complejos de proteínas como los proteasomas a través de la caracterización nativa.
- Desarrolle tratamientos basados en ARNm y AAV de forma rápida y eficiente, y garantizando el cumplimiento normativo, para la determinación de atributos críticos de calidad (CQA).
- Transforme su comprensión de la eficacia y la seguridad de los vectores del virus adenoasociado recombinante (rAAV) al medir con precisión la información de la relación vacío-parcial-lleno.
- Comprenda la integridad y la heterogeneidad del ADN plasmídico utilizado en las terapias génicas.
- Evalúe las características de las partículas similares a virus (VLP) utilizadas en las vacunas, como las que se utilizan contra el chikungunya o la hepatitis B.
Uso recomendado: Para la medición directa de productos biológicos en el intervalo de megadaltons y más allá.
Caracterización de rutina de analitos en el régimen de megadaltons y más allá
Como técnica analítica de masa ultraalta, la CDMS utiliza la tecnología de trampa de iones lineal electrostática (ELIT) para proporcionar mediciones directas de iones individuales mediante la determinación simultánea de su relación masa-carga (m/z) y su carga (z). Con la CDMS, su laboratorio puede determinar información precisa sobre el peso molecular y revelar la heterogeneidad de las muestras. Las aplicaciones de CDMS se amplían a diversas modalidades, que incluyen glutamato deshidrogenasa, plásmidos de ADN, bacteriófagos, cápsides virales, vacunas, partículas similares a virus y nanopartículas.
Evaluación sistemática y exacta de la integridad del producto de los rAAV
La CDMS con ionización por electrospray (ESI) puede ser una herramienta eficaz para acelerar el desarrollo de procesos y respaldar el control de calidad de rAAV. Es capaz de distinguir partículas vacías, llenas y parcialmente llenas de cápsides de rAAV con facilidad y rapidez, además de proporcionar una cuantificación relativa. La CDMS también se puede utilizar para identificar serotipos de rAAV y estudiar genes de interés (GOI) mediante la eyección del genoma.
Medición directa de la masa intacta de complejos de proteínas; no se requiere desconvolución
La CDMS permite la medición directa de grandes complejos proteicos y revela sus estados nativos, lo que permite a los científicos obtener una visión más profunda de los mecanismos de las funciones biológicas. Aquí se muestra un ejemplo de la medición de masa del proteasoma intacto de 28 mer de la partícula central 20S (20S CP). La masa intacta del complejo se midió directamente (734 kDa) con una desviación de <2 % en comparación con el valor de masa indicado en la bibliografía.