Scambio Idrogeno-Deuterio - Spettrometria di Massa

La MS a scambio idrogeno-deuterio (HDX) serve per molte applicazioni, tra cui la comprensione del modo in cui i farmaci a piccole molecole si legano ai bersagli proteici e l’esecuzione della mappatura degli epitopi. Con questa tecnologia, la MS misura le variazioni quando il deuterio in una soluzione sostituisce l’idrogeno ammidico nella struttura portante di una biomolecola.

Sulla struttura portante di una biomolecola, lo scambio tra l’idrogeno ammidico e il deuterio in soluzione avviene a velocità diverse, in parte a seconda della conformazione. La MS è in grado di misurare queste variazioni e quindi dedurre il grado di attività in vari siti. Queste posizioni possono essere identificate e mappate sulla sequenza primaria, il che consente una visualizzazione più semplice e rivela informazioni sulla struttura delle proteine. Il folding relativo e la dinamica possono essere determinati in base alle diverse velocità di assorbimento in posizioni diverse.

Con UPLC-MS^E, il laboratorio può generare un set di dati completo, misurando tutti i peptidi senza distorsione in base all'intensità del loro segnale. Questa è una caratteristica importante per gli studi HDX, in cui le informazioni chiave potrebbero trovarsi nei peptidi a bassa intensità.

HDX-MS rivela nuove informazioni sulla dinamica delle biomolecole, fornendo dettagli sull’assorbimento relativo del deuterio in diverse conformazioni di una proteina o in diverse posizioni all’interno della proteina stessa. I recenti sviluppi hanno reso la tecnologia HDX con spettrometria di massa uno strumento più accessibile per studiare le dinamiche della struttura di ordine superiore (HOS) dei farmaci bioterapeutici. Le tendenze del settore e delle normative hanno chiaramente spostato il focus sulla conformazione e sulle relazioni tra le biomolecole, facendo di HDX uno strumento chiave che viene rapidamente adottato in aree di analisi di ambito bioterapeutico.