Flujo de trabajo optimizado

El kit de N-glicanos GlycoWorks RapiFluor-MS reduce la dificultad y el tiempo de preparación de las muestras. 

• Protocolo de fácil seguimiento
• Disponibilidad de consejos y trucos detallados para una fácil adaptación
• Formación fácil para no expertos en glicanos

Preparación de muestras rápida

Ahora, se puede completar todo el proceso, desde la glicoproteína a la muestra lista para analizar, en menos de 30 minutos*. Esto es posible gracias a la deglicosilación rápida combinada con el marcaje instantáneo.

• Aumento de la eficacia del laboratorio
• Análisis rápido de muestras de screening y obtención de resultados a tiempo
• Ver el proceso en el vídeo de demostración on-line

* Ejemplo para una muestra típica de mAb, es posible que la deglicosilación tenga que adaptarse en función del tipo de muestra

Sensibilidad sin precedentes

RapiFluor-MS es un reactivo compuesto de un grupo de marcaje rápido de carbamato de N-hidroxisuccinimida (NHS), un fluoróforo de quinolina eficiente y una amina terciaria muy básica para favorecer la ionización por MS. Como carbamato NHS, al contrario que los reactivos de marcaje rápido alternativos, se va hidrolizando con el tiempo para generar dióxido de carbono y la amina correspondiente. Esto convierte el proceso de marcaje de RapiFluor-MS en una reacción de autoinhibición.

Mejora de las propiedades químicas para los análisis de glicanos:

• Marcaje rápido
• Fluorescencia eficiente
• Mejora de la eficacia de la ionización

Un kit, 96 muestras

El kit de N-glicanos GlycoWorks RapiFluor-MS suministra suficientes materiales para procesar 96 muestras, 24 de cada vez. 

• Módulo de deglicosilación: Rapid PNGase F, solución tampón específica, surfactante RapiGest SF y el patrón de comprobación de masa de mAb intactos como control para optimizar el protocolo.
• Módulo de marcaje: Reactivo y eluyente del reactivo RapiFluor-MS.
• Módulo de limpieza: Placa GlycoWorks µElution HILIC* y la solución tampón de elución y diluyente de la muestra de GlycoWorks.
• Módulo de recolección de muestras: Tubos, tapas, placa de recogida y placa de desechos necesarias para manipular las muestras.

* Es necesario un sistema de extracción de vacío o procesador de presión positiva para la placa µElution.

Caracterización simplificada

RapiFluor-MS proporciona un aumento de la cuantificación por fluorescencia junto a una intensidad de señal espectral de masas sin precedentes. Los glicanos poco abundantes pueden, por tanto, ser asignados y caracterizados fácilmente mediante detección por fluorescencia y espectrometría de masas en serie. Se puede usar menos cantidad de muestra sin dejar de obtener una mejora en la sensibilidad.

Cuando se analizaron glicanos marcados mediante cromatografía HILIC, RapiFluor-MS produjo los resultados siguientes comparados con lo indicado a continuación:

• Análogo de marcaje rápido comercial de aminobenzamida (AB); señal de fluorescencia 2 veces mayor y señal de MS 1000 veces mayor
• Aminación reductiva convencional con 2-AB; señal de fluorescencia 4 veces mayor y señal de MS 160 veces mayor

Asignación de una masa a cada pico de glicano

El detector de masas QDa para ACQUITY detecta de forma rutinaria N-glicanos marcados con RapiFluor-MS. 

• Se logra una respuesta equivalente de FLR y MS en un solo análisis, con la ventaja añadida de la confirmación de masa.
• Permite un mayor rendimiento dirigido a la obtención de perfiles de glicanos para una mejor información del desarrollo del proceso.
• Fácilmente integrado con los flujos de trabajo de UPLC para el cumplimiento de las GMP con el software Empower.