Gli ADC sono una classe di principi attivi biofarmaceutici che trasportano agenti che uccidono il cancro direttamente a livello delle cellule tumorali, per un approccio molto più mirato rispetto alla chemioterapia convenzionale. L’ottimizzazione degli ADC richiede tecnologie analitiche per caratterizzare in modo completo la molecola, inclusi i suoi attributi biochimici come il rapporto farmaco-anticorpo (DAR) e i siti di coniugazione.
Nel loro continuo studio dell’uso degli ADC come classe di terapie antitumorali, le organizzazioni biofarmaceutiche devono affrontare sfide significative nell’analisi delle loro strutture complesse ed eterogenee. Tuttavia, un ADC ben caratterizzato è fondamentale per passare dalla discovery allo sviluppo clinico e alla commercializzazione.
Affronta con successo le sfide di caratterizzazione con informazioni eccezionali sulle molecole, ottenute grazie ai prodotti fit-for-purpose di cromatografia liquida ad alte prestazioni (UPLC), spettrometria di massa ad alta risoluzione (MS), fasi stazionarie delle colonne e soluzioni informatiche. Affidati a Waters per semplificare l’analisi di molecole complesse e accelerare la caratterizzazione ADC e il monitoraggio degli attributi critici di qualità.
Studio: In che Modo Waters Contribuisce a Supportare lo Sviluppo di Nuove Terapie
Accelera il percorso dall’analisi del campione al processo decisionale con waters_connect per i applicazioni biofarmaceutiche, con workflow su misura progettati per applicazioni LC-MS biofarmaceutiche, massa intatta, mappatura dei peptidi, Peptide MAM e analisi di rilascio degli N-glicani.
È possibile ottenere analisi LC di alta qualità e determinare il DAR di ADC coniugati con cisteina e altamente idrofobici utilizzando le colonne Waters Protein-Pak Hi Res Hydrophobic Interaction Chromatography (HIC) HPLC per separazioni rapide ed efficienti.
Le colonne in fase inversa per bio-coniugati e farmaci anticorpo-coniugati con HPS MaxPeak, come le colonne ACQUITY e XBridge Premier Protein BEH C4, sono progettate esclusivamente per ridurre al minimo le interazioni secondarie tra gli ADC e l’hardware della colonna e sono adatte per l’analisi di ADC coniugati con lisina. A differenza degli ADC coniugati con cisteina, i legami disolfuro intracatena che mantengono i collegamenti tra le catene pesanti e leggere dei mAb per gli ADC coniugati con lisina sono intatti. Pertanto, la cromatografia in fase inversa è adatta per l’analisi di ADC coniugati con lisina quando la chimica del linker non è labile a pH acido. Inoltre, Waters offre colonne in fase inversa con tecnologia a particelle solid-core, come BioResolve RP mAb Polyphenyl per l’analisi di molecole intere e subunità per determinare la localizzazione dei farmaci legati a livello di dominio.
Elimina la necessità di creare più fasi mobili dell’eluente SEC con proteine diverse utilizzando un metodo in piattaforma con soluzione salina tamponata con fosfato (ad esempio, PBS) per ottenere dati aggregati, monomerici e frammentati costantemente accurati con le colonne Waters SEC. Inoltre, per i bio-coniugati che possono essere idrofobici e creare interazioni secondarie indesiderate, non è necessario aggiungere solvente organico con le colonne MaxPeak Premier Protein SEC e le particelle BEH legate con PEO.
Misura con precisione i profili delle varianti di carica di ADC legati con cisteina e lisina con la colonna BioResolve SCX mAb e i concentrati per tampone BioResolve CX pH per i gradienti salini o di pH con interazioni secondarie minime nella rivelazione ottica. Per ottenere informazioni strutturali con la spettrometria di massa nello scambio ionico, i nostri tamponi compatibili con MS, i concentrati per tampone IonHance CX-MS pH, trasformano IEX-MS in linea in una realtà con tamponi volatili a purezza elevata adatti per la spettrometria di massa.
I coniugati anticorpo-oligonucleotidi (AOC) sono comunemente utilizzati nella diagnostica proteica e rappresentano una terapia promettente per la terapia cellulare mirata. La carica negativa netta di un AOC si espande a ogni ulteriore sito di coniugazione, con conseguente aumento della ritenzione su una resina a scambio anionico. La colonna GenPak FAX contiene un debole sorbente a scambio anionico che presenta una ritentività controllata e una selettività unica per campioni proteici e oligonucleotidici. Un recente lavoro applicativo ha dimostrato che le colonne AEX possono essere accoppiate con MALS per generare informazioni sul peso molecolare assoluto.
La cromatografia liquida a interazione idrofilica (HILIC) è stata ampiamente utilizzata per separare piccoli composti polari, ma la sua applicazione a biomolecole di grandi dimensioni, diverse dai glicani liberi, è stata sorprendentemente limitata. Con le colonne Waters Glycoprotein a pori larghi è ora possibile utilizzare HILIC per raccogliere informazioni precedentemente non ottenibili da proteine intere (con o senza glicosilazione), frammenti proteici e glicani complessi liberi.
I kit PeptideWorks per la digestione triptica delle proteine di Waters per workflow manuali o automatizzati forniscono al laboratorio una mappatura peptidica riproducibile ad alta efficienza in modo esclusivo e in meno di 2,5 ore, quattro volte più velocemente rispetto alla media dei metodi fatti in casa. Raggiungi tempi di digestione di 30 minuti con un rapporto enzima-peptide di 1:5, riduzione del 78% dei clivaggi non avvenuti e riduzione del 98% dei picchi di autolisi contaminati. PeptideWorks è ideale per la determinazione del sito di coniugazione del farmaco, la caratterizzazione strutturale proteica, l’identificazione delle proteine e il monitoraggio delle modifiche proteiche, incluse le modifiche post-traduzionali.
Con il kit GlycoWorks puoi reinventare un metodo semplificato, rapido e altamente sensibile per profilare gli N-glicani negli ADC. Ottieni prestazioni di fluorescenza e spettrometria di massa senza precedenti per l’analisi di rilascio degli N-glicani, massimizzando al contempo la produttività con una soluzione automatizzabile sul robot di pipettaggio Waters Andrew+. Con 3 soli semplici step in appena 30 minuti, il kit GlycoWorks RapiFluor-MS per N-glicani riduce la complicata e lunga preparazione dei campioni.
Semplifica e accelera la digestione delle proteine con i kit di digestione ProteinWorks eXpress. Reagenti pre-misurati con tracciabilità dei lotti e protocolli standardizzati per una quantificazione LC-MS accurata, precisa e sensibile delle proteine, inclusi gli ADC, nel plasma e nel siero. Ottieni prestazioni e flessibilità senza eguali per la digestione riproducibile delle proteine con i kit ottimizzati per vari workflow tra cui la bioanalisi proteica/DMPK.
Semplifica la preparazione dei campioni per le analisi LC-MS quantitative con workflow verificati che aiutano a minimizzare la variabilità, migliorare la tracciabilità e semplificare il trasferimento del metodo.
Ottimizza la produttività e il successo del laboratorio con Waters Global Services per mantenere sempre elevati i livelli delle prestazioni dei sistemi, ridurre al minimo i tempi di inattività, affrontare le sfide applicative e supportare severi requisiti di conformità.
Massimizza le risorse e minimizza i rischi con le opzioni di pagamento di Waters Capital, tra cui l’aggiornamento delle apparecchiature obsolete, l’assistenza personalizzata e il raggruppamento dei servizi in un unico pagamento mensile.