GTxResolve Slalom 컬럼

겔과 유사한 분리. UPLC 속도.

플라스미드 ID, 순도 및 구조적 형태를 파악하는 것은 mRNA의 대규모 재조합 단백질 생산 및 체외 전사(IVT)에 매우 중요합니다. 전통적으로, 제한 효소로 절단된 플라스미드는 아가로스 겔 전기영동법으로 분석하는데, 이 작업 과정은 노동 집약적이고 시간이 많이 소요될 수 있으며 분해능에 한계가 있습니다. Slalom 크로마토그래피는 빠른 제한 효소 맵을 제공하여 주입당 5분 이내에 대량의 분해 생성물을 분석할 수 있습니다. 이 새로운 분리를 통해 DNA 샘플의 ID 확인을 위한 제한 맵핑에 사용되는 겔과 유사한 프로파일이 제공됩니다. 또한, LC 플랫폼을 활용하면 겔 밴드를 잘라내는 방법을 대체하여, 분해된 산물을 분획 수집한 후 추가적인 특성 분석을 할 수 있습니다.

dsRNA 불순물 분석

dsRNA는 mRNA 약물 기반 치료제 및 백신의 IVT 합성 중에 생성되는 중요한 불순물입니다. 이 원치 않는 부산물은 강력한 면역 반응을 촉발하여 치료 효능을 저하시키고 환자의 안전을 위협할 수 있습니다. dsRNA 불순물의 정확한 정량은 규제 준수를 충족하고 제품 안전을 보장하는 데 필수적입니다. 본 응용 자료는 제어된 전단장(shear field) 내에서 이완 시간(relaxation time)의 변화를 이용하여 dsRNA의 높은 분리능과 감도를 제공하는 Waters GTxResolve Slalom 컬럼, MaxPeak Premier 2.5µm을 사용한 분석법을 보여줍니다.

플라스미드 토폴로지

플라스미드 DNA(pDNA)는 유전자 치료제 및 mRNA 백신을 포함한 많은 바이오의약품의 기본 구성 요소입니다. 플라스미드 제제는 종종 초나선(supercoiled), 개방형 원형(open circular) 및 선형(linear) 형태를 포함한 다양한 이성질체를 함유하고 있습니다. 원형 플라스미드는 연속 전사 및 비정상적인 전사체 생성을 유발할 수 있으므로 체외 전사(IVT)에 바람직하지 않습니다. 

각각의 이성질체는 고유한 생물학적 특성을 가지고 있으므로, 정확한 분리 및 특성화는 IVT 프로세스의 품질, 완전성 및 일관성뿐만 아니라 약물 안전성 및 효능을 보장하는 데 매우 중요합니다. 이 응용 자료에서는 Waters GTxResolve 250Å Slalom 컬럼, MaxPeak Premier 2.5µm를 사용하여 플라스미드 이성질체를 높은 분리능 속도로 정확하게 분리하는 것을 보여줍니다.