신속한 단백질 및 RNA 분해를 위한 RapiZyme 효소

재조합 RapiZyme Cusativin 및 MC1으로 분해된 HPRT sgRNA의 LC-UV-MS 분석. HPRT sgRNA를 분해하기 위해, RapiZyme Cusativin(A) 및 RapiZyme MC1(B)에 대해 세 가지의 서로 독립적인 배치에 해당하는 재조합 효소를 사용했으며, 세 가지 다른 샘플의 재현성 있는 분해 작용을 나타내기 위해 세 개의 UV 크로마토그램(검은색, 파란색, 빨간색 트레이스)을 서로 겹쳐서 표현했습니다. (C) 식별된 RapiZyme Cusativin 분해 생성물의 추출 이온 크로마토그램 오버레이로, 대표적인 TUV 트레이스에서의 존재량을 나타냅니다. (D) 식별된 RapiZyme MC1 분해 생성물의 추출 이온 크로마토그램 오버레이, 대표적인 TUV 트레이스에서의 존재량을 나타냅니다. RapiZyme MC1의 분해 생성물 중 낮은 존재량에 해당하는 분해 생성물의 프로파일은 삽입된 그림에 표시되어 있습니다.

mRNA 1의 RNase MC1 분해물에서 5’-캡 올리고뉴클레오타이드의 다양한 형태를 특성화(XIC는 상단 패널, 질량 스펙트럼은 중간 패널, MSE 조각 이온의 도트맵은 하단 패널). 캡핑된 올리고뉴클레오타이드(a), 메틸화되지 않은 캡 형태(b), 캡핑되지 않은 형태(c)의 검출.

돼지 뇌 조직에서 GEM91, GEM132, 지질 결합 ASO에 대한 올리고뉴클레오타이드 추출 성능을 시연. 용매 보조 Proteinase K에 의한 조직 균질화 및 분해를 거친 후 OligoWorks SPE 마이크로플레이트 및 시약을 사용한 혼합 모드 SPE 정제를 통해 80% 이상의 회수율 및 우수한 반복성(표준편차 10% 이하)을 확인(A); 내부 표준 보정 없이 0.99 이상의 추출 직선성 달성(B).

Discovery HCP 분석을 사용하여 NIST mAb 분해에서 확인된 낮은 존재량의 두 HCP 펩타이드에 대한 추출 질량 크로마토그램.