SEC カラム
ペプチド、タンパク質、核酸、LNP、ウイルスベクターのサイズに基づく分離
タンパク質およびペプチドの特性解析用の幅広い Waters サイズ排除クロマトグラフィー(SEC)カラムおよびスタンダードにより、比類のないバッチ間再現性を達成します。
SEC は、インスリンやモノクローナル抗体(mAb)をはじめとするバイオ医薬品の研究開発および製造において、凝集体やフラグメントの分析に用いられる強力な手法です。SEC(別名ゲルろ過クロマトグラフィー)では、タンパク質を溶液中のサイズ(絶対分子量ではなく流体力学半径)に基づいて分離することができ、サイズが大きい分子種は小さいタンパク質より先に溶出します。
このアイソクラティックベースの手法は、カラムに充塡された SEC 粒子のポアサイズとボリュームに基づいているため、カラムの選択が重要になります。対象タンパク質の分子量が大きいほど、比較的ポアサイズの粒子が大きな SEC カラムを選択します。
タンパク質分析向け MaxPeak Premier SEC カラム
最小限の分析法開発で、あらゆる LC システムで SEC 結果を改善します。
仕様
概要
- MaxPeak Premier テクノロジーと BEH-PEO パーティクルテクノロジーを組み合わせて活用して、10,000 ~ 650,000 Da のタンパク質の分析向けのこの「プラットフォームベース」の分析法で効率を向上
- エチレン架橋型ハイブリッド(BEH)SEC 粒子により、望ましくない二次的相互作用を最小限に抑え、分離の再現性と結果を改善
- 関連するペプチド、タンパク質、mAb サンプルで品質管理試験済みのカラムにより、信頼性の高いカラム間およびバッチ間性能を実現
- ウォーターズの UPLC システムで粒子径 1.7 μm のカラムを用いて信頼性の高いハイスループット分析を達成し、HPLC、UHPLC、UPLC システムで 2.5 μm カラムを用いて再現性の高い分離を実現して多様なアプリケーションニーズに対応
- SEC ガードにより分析カラムの寿命を延長し、分析 1 回ごとのコストを削減
- 利用可能な BEH125、BEH200、BEH450、mAb サイズバリアントスタンダードにより、SEC カラムおよび LC システムの性能を現場で確認
- cGMP、ISO 9001 認証済み工場で、厳格な製造プロトコルと超高純度の試薬を使用して製造
推奨用途:サイズベースのペプチド、タンパク質、ウイルスベクターの分析。
カラム推奨のためのバンド拡散仕様
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ACQUITY Premier Protein SEC 250 Å ガードカラムおよびカラム
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ACQUITY UPLC Protein BEH SEC 125 Å、200 Å、450 Å ガードカラムおよびカラム
低拡散 UPLC システム用の 1.7 μm のガードおよびカラム
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XBridge Premier Protein SEC 250 Å ガードカラムおよびカラム
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XBridge Protein BEH SEC 125 Å、200 Å、450 Å ガードカラムおよびカラム
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BioResolve mAb SEC ガードカラムおよびカラム
UHPLC システム用の 2.5 μm のガードカラムおよびカラム
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XBridge Protein BEH SEC 125 Å、200 Å、450 Å ガードカラムおよびカラム
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XBridge Premier Protein SEC 250 Å ガードカラムおよびカラム
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BioResolve mAb SEC ガードカラムおよびカラム
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BioSuite SEC ガードカラムおよびカラム
HPLC システム用 3.5 μm ガードカラムおよびカラム
GTxResolve SEC カラム
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UHPLC 分離および UPLC 分離のための粒子径 2.5 µm のカラム
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二次的相互作用とノイズが少ないため、プラットフォームメソッドに適している
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バイオ医薬品サンプルの分析に必要な低吸着ハードウェア
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ポアサイズ 450 Å で分離能が最大 50% 高いため、必要なサンプル消費量が低減し、分析が迅速になる
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UHPLC 分離および UPLC 分離のための 3 µm カラム
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直径 80 ~ 200 nm の GTx 薬物の凝集体分析に適した 1000 Å カラム
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二次的相互作用が少なく、MALS などの汎用的な検出器との適合性が向上
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バイオ医薬品サンプルの分析に必要な低吸着ハードウェア
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プラスミド DNA、ウイルスベクター、脂質ナノ粒子を含むメガダルトンサイズの生体分子の UHPLC および UPLC 分離については 3 µm
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直径 800 ~ 2500 Å の分析種
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3 µm のエチレン架橋で結合した OH-PEO 粒子
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MaxPeak HPS ハードウェア
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迅速なコンディショニングおよび低 MALS ノイズ
Protein SEC カラム
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UPLC 分離用の粒子径 2 µm 以下のカラム
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ポアサイズ 250 Å
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低拡散 UPLC システムで 10,000 ~ 650,000 Da の生体分子のハイスループットで高分離能の SEC 分離を実現
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分析用 SEC カラムの寿命を延長できる SEC ガードカラム
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MaxPeak Premier テクノロジーと BEH-PEO 粒子テクノロジーにより、望ましい SEC プラットフォームに基づく分析法のために、望ましくないイオン性および疎水性相互作用を大幅に低減
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HPLC および UHPLC 分離のための 2.5 µm 粒子カラム
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ポアサイズ 250 Å
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あらゆる LC システムで 10,000 ~ 650,000 Da の生体分子の高分離能 SEC 分離を実現
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分析用 SEC カラムの寿命を延長できる SEC ガードカラム
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MaxPeak Premier テクノロジーと BEH-PEO 粒子テクノロジーにより、望ましい SEC プラットフォームに基づく分析法のために、望ましくないイオン性および疎水性相互作用を大幅に低減
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特別に設計され、NIST ベースの mAb サイズバリアントスタンダードを用いて QC 試験を行うことで、バッチ間の一貫性を保証
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UPLC、UHPLC および HPLC 分離のための 2.5 μm 粒子カラム
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ポアサイズ 200 Å
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モノクローナル抗体(mAb)、関連する高分子量凝集体(300,000 Da 超)、および低分子量フラグメント(100,000 Da 未満など)の再現性の高い正確な定量を達成
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各充塡済みカラムを NIST ベースの mAb サイズバリアントスタンダードを用いて試験することで、バッチ間およびカラム間の性能の一貫性を保証
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UPLC 分離用の粒子径 2 μm 以下のカラム(450 Å では 2.5 μm)
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ポアサイズには 125 Å、200 Å、450 Å などがご利用可能
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分析用 SEC カラムの寿命を延長できる SEC ガードカラム
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特別に設計され、BEH125、BEH200、または BEH450 タンパク質スタンダードを用いて QC 試験を行うことで、バッチ間の一貫性を保証
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従来の HPLC ベースの SEC よりも 10 倍迅速
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あらゆる UPLC、UHPLC、またはHPLC システムで使用できる 2.5 μm 粒子カラム
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ポアサイズには 125 Å、200 Å、450 Å などがご利用可能
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分析用 SEC カラムの寿命を延長できる SEC ガードカラム
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特別に設計され、BEH125、BEH200、または BEH450 タンパク質スタンダードを用いて QC 試験を行うことで、バッチ間の一貫性を保証
ペプチド SEC カラム
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シリカベースのジオール SEC カラム
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分子量排除限界は、選択したポアサイズが主な決定要因
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分析カラムおよび分取カラムのサイズで利用可能
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10 μm ジオール結合シリカに基づく
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分子量に 2 倍の差があるタンパク質を分離
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分子量に 15 % の差があるタンパク質を区別
ラボに適した SEC カラムの選択
SEC は、インスリンやモノクローナル抗体(mAb)をはじめとするバイオ医薬品ペプチド、タンパク質、ウイルスベクターの研究開発および製造において、凝集体やフラグメントの分析に最適ですが、分析に適したカラムの選択が重要となります。以下の基準を使用して、インスリン、モノクローナル抗体、アデノ随伴ウイルス(AAV)などの多様な生体分子について、信頼性が高く質の高い SEC 分析が行えるカラムを選択します。
SEC カラム選択時の考慮事項:
サンプルの分子量はどのくらいか?
使用する LC システムのバンド拡散は?
分子量(MW)の差が 2 倍未満の成分の分離を行うか?
分子量(MW)の差が 2 倍超の成分の分離を行うか?
複雑な SEC 分離に対処
ACQUITY Premier Protein SEC および XBridge Premier Protein SEC カラムおよびガードでは、SEC ベースのテクノロジーの進展により、望ましくない特異的イオン性相互作用および疎水性相互作用に対処し、信頼性の高い結果を実現します。
MaxPeak Premier SEC カラムの利点:
困難なアプリケーションにおいて、注入したサンプル中のサイズの差が 2 倍未満の成分を、再現性よく分離
「プラットフォーム SEC 分析法」を使用することで、分析法開発にかかる時間と経費を削減
バッチ間およびカラム間の性能を保証
リソース
関連情報
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SEC(サイズ排除クロマトグラフィー)カラムは、分子をサイズに基づいて分類し研究するために実験室で使用されるツールの一種です。これらは、分子をその大きさによって分離するフィルターのようなものです。以下はその動作原理です:
分子の分類方法:SECは分子を化学的性質ではなくサイズで分類します。大きな分子はカラムの小さな孔に入れないため、カラムを速く通過します。一方、小さな分子は孔に入り込むことができるため、通過に時間がかかります。
カラム材料:カラム材料は、アガロースやデキストランのような物質で作られた小さな粒子で構成されており、これらの粒子には孔があります。これらの孔のサイズが、どのサイズの分子が通過できるか、どの分子が引っかかるかを決定します。
移動の仕組み:移動相と呼ばれる液体が分子をカラム内で運びます。他の方法とは異なり、SECではこの液体はプロセス全体を通じて変わりません。
サンプルの注入:異なるサイズの分子が混ざったサンプルがカラムに注入されます。移動する際、大きな分子は孔に入れないため速く移動し、小さな分子は孔に入るため、出てくるのに時間がかかります。
分子の検出:科学者は、カラムから出てくる分子を検出するために、光を当てたり、光の散乱を測定したりする方法を使用します。これにより、サンプルに何が含まれているか、どれくらいの量があるかを把握することができます。
用途:SECカラムは、生物学、医学、化学など多くの分野で、タンパク質、DNA、その他の大きな分子を研究するために使用されます。これらの物質のサイズや純度を把握することは、それらの働きを理解するために非常に重要です。
SECカラムは、分子をサイズで分離することで、複雑な物質に関する重要な情報を提供するため、科学者にとって重要なツールです。
SECカラムに関するFAQ
1. Watersはどのような種類のSECカラムを提供していますか?
Watersは、さまざまな分析ニーズに対応する多様なSEC(サイズ排除クロマトグラフィー)カラムを提供しています。これには、タンパク質、ペプチド、核酸、ポリマーの分離と分析に特化したカラムが含まれます。
タンパク質分析には、高解像度と優れた再現性を提供するACQUITY UPLC BEH SECカラムがあり、ポリマー分析には、その堅牢性と広い分子量範囲で人気のあるStyragelカラムがあります。
各カラムタイプは特定の分子量範囲と分離要件に最適化されており、特定のアプリケーションに適したカラムを見つけることができます。
2. Waters SECカラムを使用するためにサンプルをどのように準備すればよいですか?
適切なサンプル準備のためには、まず0.22または0.45ミクロンのフィルターを通してサンプルをろ過し、カラムを詰まらせる可能性のある粒子を除去します。サンプルが沈殿や凝集を避けるために、移動相と一致する適切なバッファーまたは溶媒に溶解されていることを確認してください。
タンパク質を扱う場合、変性を防ぐために適切なpHとイオン強度を維持することが重要です。サンプルを適切な体積に濃縮し、カラムを過負荷にしないように注意してください。過負荷は解像度の低下やピークの広がりを引き起こす可能性があります。
3. Waters SECカラムの長期使用性を確保するためにどのようにメンテナンスと保管を行えばよいですか?
Waters SECカラムの長期使用性を確保するためには、適切なメンテナンスと保管が重要です。使用後は、残留サンプルを除去し、汚染を防ぐために適切な溶媒またはバッファーでカラムを十分に洗浄してください。カラム材料を水和状態で安定させるために、通常は分離に使用した移動相にカラムを保管します。
極端な温度での保管を避け、蒸発や乾燥を防ぐためにしっかりと密封してください。圧力や解像度などのパラメータを定期的に監視し、問題が発生した場合は迅速に対処してカラムの寿命を延ばしてください。