Mappatura dei Peptidi

Mappatura dei Peptidi

Con le soluzioni Waters per la mappatura dei peptidi ottieni informazioni impareggiabili su identificazione, stabilità e modifiche delle proteine. Le soluzioni di sistema Waters fit-for-purpose combinano preparazione dei campioni, colonne, automazione, strumentazione e software con la metodologia, l’usabilità, la documentazione e il supporto delle applicazioni, per una migliore risoluzione delle complesse digestioni di proteine e glicoproteine con una maggiore produttività.

Con le soluzioni Waters per la mappatura dei peptidi ottieni informazioni impareggiabili su identificazione, stabilità e modifiche delle proteine. Le soluzioni di sistema Waters fit-for-purpose combinano preparazione dei campioni, colonne, automazione, strumentazione e software con la metodologia, l’usabilità, la documentazione e il supporto delle applicazioni, per una migliore risoluzione delle complesse digestioni di proteine e glicoproteine con una maggiore produttività.
Peptide molecular structure in blue
Peptide molecular structure in blue

Panoramica

La mappatura dei peptidi è fondamentale per la caratterizzazione e il monitoraggio completi dei prodotti biofarmaceutici. Per ottenere una risoluzione cromatografica adeguata per separare in modo affidabile ciascun frammento risultante dalla digestione, sono necessari metodi robusti e riproducibili, con un rendimento cromatografico eccezionale.

Le soluzioni Waters per la mappatura dei peptidi combinano automazione, preparazione dei campioni, separazione cromatografica, spettrometria di massa e workflow software onnicomprensivi per offrire analisi senza precedenti dei digeriti di proteine e glicoproteine complesse con un’elevata produttività. Le soluzioni Waters per l’analisi quantitativa supportano una caratterizzazione efficace, il trasferimento del metodo e il monitoraggio compliance-ready per i laboratori che eseguono analisi in routine. Raggiungi i tuoi obiettivi di ricerca e sviluppo con i workflow Waters di mappatura dei peptidi, robusti e affidabili.

Applicazioni

La caratterizzazione della mappatura dei peptidi è essenziale per determinare la struttura degli amminoacidi primari e gli attributi di qualità delle proteine, inclusi gli anticorpi monoclonali (mAb) e i farmaci anticorpo-coniugati (ADC).

Dopo la digestione delle proteine, ciascun peptide successivo fornisce informazioni su sequenza, tempo di ritenzione e intensità per confermare l’intera sequenza proteica. Waters offre potenti hardware e workflow software per la spettrometria di massa per comprendere miscele digerite complesse e sviluppare metodologie adatte per il trasferimento ai laboratori che conducono analisi in routine.

La caratterizzazione della mappatura dei peptidi è essenziale per determinare la struttura degli amminoacidi primari e gli attributi di qualità delle proteine, inclusi gli anticorpi monoclonali (mAb) e i farmaci anticorpo-coniugati (ADC).

Dopo la digestione delle proteine, ciascun peptide successivo fornisce informazioni su sequenza, tempo di ritenzione e intensità per confermare l’intera sequenza proteica. Waters offre potenti hardware e workflow software per la spettrometria di massa per comprendere miscele digerite complesse e sviluppare metodologie adatte per il trasferimento ai laboratori che conducono analisi in routine.

Note Applicative

Note Applicative

Poiché le agenzie di regolamentazione richiedono la conferma della struttura del prodotto desiderato per dimostrare la comprensione del processo durante lo sviluppo e per scopi di rilascio dei lotti, il monitoraggio degli attributi dei peptidi LC-MS svolge un ruolo cruciale per garantire la qualità e la sicurezza dei farmaci bioterapeutici.

La sua adozione si sta espandendo in aree quali i metodi multi-attributo (MAM), che consentono di monitorare più attributi di qualità dei prodotti (PQA) e attributi di qualità critici (CQA) all’interno di una singola analisi. È inoltre in grado di rivelare impurezze e modifiche non note quali ossidazione, deammidazione, modifica con succinimmide, glicosilazione, modifiche dei terminali C e N e isomerizzazione.

Poiché le agenzie di regolamentazione richiedono la conferma della struttura del prodotto desiderato per dimostrare la comprensione del processo durante lo sviluppo e per scopi di rilascio dei lotti, il monitoraggio degli attributi dei peptidi LC-MS svolge un ruolo cruciale per garantire la qualità e la sicurezza dei farmaci bioterapeutici.

La sua adozione si sta espandendo in aree quali i metodi multi-attributo (MAM), che consentono di monitorare più attributi di qualità dei prodotti (PQA) e attributi di qualità critici (CQA) all’interno di una singola analisi. È inoltre in grado di rivelare impurezze e modifiche non note quali ossidazione, deammidazione, modifica con succinimmide, glicosilazione, modifiche dei terminali C e N e isomerizzazione.

Note Applicative

Note Applicative

La rivelazione ottica (come quella UV) viene spesso utilizzata per monitorare i peptidi. Questo approccio è considerato lo standard di riferimento per i test di identità e qualità negli ambienti QA/QC. I peptidi possono essere monitorati in base al profilo, all’abbondanza e al tempo di ritenzione, che possono indicare attributi di qualità critici (CQA).

Metodi analitici riproducibili e robusti richiedono una validazione approfondita, risultando in metodologie in grado di fornire informazioni critiche sulle proteine bioterapeutiche, supportando la loro caratterizzazione e valutazione della qualità.

La rivelazione ottica (come quella UV) viene spesso utilizzata per monitorare i peptidi. Questo approccio è considerato lo standard di riferimento per i test di identità e qualità negli ambienti QA/QC. I peptidi possono essere monitorati in base al profilo, all’abbondanza e al tempo di ritenzione, che possono indicare attributi di qualità critici (CQA).

Metodi analitici riproducibili e robusti richiedono una validazione approfondita, risultando in metodologie in grado di fornire informazioni critiche sulle proteine bioterapeutiche, supportando la loro caratterizzazione e valutazione della qualità.

Note Applicative

Note Applicative

eBook: Mappatura dei Peptidi per Prodotti Bioterapeutici

La mappatura dei peptidi rimane uno dei più importanti saggi ricchi di dati applicati per la caratterizzazione e il monitoraggio biofarmaceutici. Le soluzioni contenute in questo eBook (preparazione dei campioni, automazione, separazione cromatografica e identificazione della massa) forniscono ai ricercatori le strategie per migliorare e semplificare il difficile compito della mappatura dei peptidi. Ad esempio, le innovazioni nella digestione triptica con RapiZyme Tripsina, una tripsina ricombinante metilata in modo omogeneo, consentono una maggiore velocità, fedeltà della digestione e bassi livelli di peptidi derivati dalla tripsina grazie alla sua resistenza all’autolisi, alla purezza e all’elevata attività per mappe peptidiche più affidabili e riproducibili.

La mappatura dei peptidi rimane uno dei più importanti saggi ricchi di dati applicati per la caratterizzazione e il monitoraggio biofarmaceutici. Le soluzioni contenute in questo eBook (preparazione dei campioni, automazione, separazione cromatografica e identificazione della massa) forniscono ai ricercatori le strategie per migliorare e semplificare il difficile compito della mappatura dei peptidi. Ad esempio, le innovazioni nella digestione triptica con RapiZyme Tripsina, una tripsina ricombinante metilata in modo omogeneo, consentono una maggiore velocità, fedeltà della digestione e bassi livelli di peptidi derivati dalla tripsina grazie alla sua resistenza all’autolisi, alla purezza e all’elevata attività per mappe peptidiche più affidabili e riproducibili.
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Soluzioni

I sistemi LC e LC-MS Waters offrono prestazioni e sensibilità di separazione all’avanguardia per l’analisi della mappatura dei peptidi.

I sistemi LC e LC-MS Waters offrono prestazioni e sensibilità di separazione all’avanguardia per l’analisi della mappatura dei peptidi.

Caratterizzazione e monitoraggio efficienti dei peptidi durante l’intero ciclo di vita del prodotto

Caratterizzazione e monitoraggio efficienti dei peptidi durante l’intero ciclo di vita del prodotto
Sistema BioAccord LC-MS

Agevola le analisi LC-MS a livello di peptidi in ogni laboratorio con il sistema Waters BioAccord LC-MS che include il software waters_connect per l’analisi dei dati e la reportistica compliance-ready.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

Funzionalità complete ad alta risoluzione per una caratterizzazione e un trasferimento del metodo sicuri

Funzionalità complete ad alta risoluzione per una caratterizzazione e un trasferimento del metodo sicuri
Xevo G3 QTof

Accelera la caratterizzazione e il monitoraggio multi-attributo con il sistema da banco Xevo G3 QTof per HRMS ad alte prestazioni che fornisce risultati qualitativi e quantitativi accurati.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

Adsorbimento ultra-basso per sensibilità e riproducibilità massime

Adsorbimento ultra-basso per sensibilità e riproducibilità massime
Soluzioni MaxPeak Premier

Grazie alle colonne e ai sistemi MaxPeak Premier, puoi eliminare l’imprevedibilità delle perdite di analiti dovute alle interazioni con i metalli, che possono essere particolarmente pronunciate con le molecole biologiche.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Software compliance-ready basato su applicazioni e collegabile in rete per semplificare acquisizione dei dati LC-MS, elaborazione e reportistica.

Software compliance-ready basato su applicazioni e collegabile in rete per semplificare acquisizione dei dati LC-MS, elaborazione e reportistica.

 Semplifica l’analisi e l’elaborazione dei dati

 Semplifica l’analisi e l’elaborazione dei dati
waters_connect per applicazioni biofarmaceutiche

Accelera il percorso dall’analisi del campione al processo decisionale con waters_connect per il settore biofarmaceutico, che offre app e workflow dedicati per MAM, analisi di massa intatta, conferma della sequenza e altro ancora.

  • Peptide MAM
  • Intact and Subunit MAM
  • Peptide Multi Attribute Monitoring

Semplificazione dell’acquisizione e del processamento dei dati, e della reportistica

Semplificazione dell’acquisizione e del processamento dei dati, e della reportistica

Dota il laboratorio del sistema di elaborazione dati cromatografici (CDS) del software Empower e ottieni una gestione avanzata dei dati di laboratorio per le analisi delle impurezze, tra cui acquisizione, elaborazione e reportistica per strumenti cromatografia liquida.

Sistema di Elaborazione Dati Cromatografici (CDS) Empower
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Colonne e materiali di consumo che offrono prestazioni LC e LC-MS all’avanguardia per la mappatura dei peptidi

Colonne e materiali di consumo che offrono prestazioni LC e LC-MS all’avanguardia per la mappatura dei peptidi

Massimizzazione della sensibilità con riduzione al minimo dell’adsorbimento dei metalli dei peptidi acidi deamidati 

Massimizzazione della sensibilità con riduzione al minimo dell’adsorbimento dei metalli dei peptidi acidi deamidati 
Colonne MaxPeak Premier Peptide

Migliora il recupero e la sensibilità per i peptidi acidi con le colonne Waters ACQUITY, XSelect e XBridge Premier Peptide sottoposte a QC in lotti con standard Waters Cytochrome c Digest per una migliore uniformità delle prestazioni da colonna a colonna. 

  • Reversed-Phase Peptide Columns
  • Peptide Mapping
  • Protein Digestion
  • Tryptic Digestion

Digestione delle proteine rapida, pulita e completa

Digestione delle proteine rapida, pulita e completa
RapiZyme Tripsina, Grado Spettrometria di Massa (MS)

Digestione mAb rapida, pulita e completa in soli 30 minuti con RapiZyme Tripsina di grado MS, un enzima altamente attivo resistente all’autolisi che riduce la probabilità che si verifichino modificazioni artificiali durante la preparazione dei campioni prima dell’analisi LC-MS.

  • Tryptic Digestion
  • Protein Digestion
  • Peptide Mapping

Preparazione dei campioni semplificata per la mappatura dei peptidi

Preparazione dei campioni semplificata per la mappatura dei peptidi
Kit PeptideWorks per la Digestione Triptica delle Proteine

Ottieni mappe peptidiche riproducibili ad alta efficienza in meno di 2,5 ore con i kit di digestione triptica delle proteine PeptideWorks per workflow manuali o automatizzati, 4 volte più rapidi rispetto ai metodi casalinghi comuni e con una riduzione del 78% dei clivaggi mancati.

  • Tryptic Digestion
  • Protein Digestion
  • Peptide Mapping

Benchmark e validazione facili delle colonne per peptidi

Benchmark e validazione facili delle colonne per peptidi
Kit e Standard Peptidici

Verifica le prestazioni della colonna e controllane le condizioni durante il suo ciclo di vita con gli standard Waters per peptidi ed esegui le separazioni dei peptidi su qualsiasi sistema UPLC, HPLC o LC-MS utilizzando standard preconfezionati specificatamente formulati per ridurre al minimo la perdita di campione e le discrepanze.

  • Peptide Standards
  • Peptide Mapping
  • Protein Digestion
  • Tryptic Digestion

Guadagna efficienza e risparmia tempo con le soluzioni verificate per l’automazione del laboratorio.

Guadagna efficienza e risparmia tempo con le soluzioni verificate per l’automazione del laboratorio.

Migliora l’efficienza e la produttività nella preparazione dei campioni

Migliora l’efficienza e la produttività nella preparazione dei campioni
Automazione e Apparecchiature di Laboratorio

Semplifica la preparazione dei campioni per le analisi LC-MS con l’automazione del laboratorio e le apparecchiature Waters che offrono workflow verificati per ridurre al minimo la variabilità, migliorare la tracciabilità e semplificare il trasferimento del metodo.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

Il tuo successo a portata di clic

Il tuo successo a portata di clic
Waters Global Services

Ottimizza la produttività e il successo del laboratorio con Waters Global Services per mantenere sempre elevati i livelli delle prestazioni dei sistemi, ridurre al minimo i tempi di inattività, affrontare le sfide applicative e supportare severi requisiti di conformità.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

La scienza è più accessibile con Waters Capital

La scienza è più accessibile con Waters Capital
Soluzioni di Pagamento

Massimizza le risorse e minimizza i rischi con le opzioni di pagamento di Waters Capital, tra cui l’aggiornamento delle apparecchiature obsolete, l’assistenza personalizzata e il raggruppamento dei servizi in un unico pagamento mensile.

  • Peptide Map Characterization
  • Peptide Multi Attribute Monitoring
  • Peptide Mapping with Optical Detection

I dati parlano da soli

I dati parlano da soli
Confronto dell’area (%) tra il sistema ACQUITY UPLC I-Class PLUS e il sistema binario ACQUITY UPLC H-Class PLUS Bio (con miscelatore da 340 µL e ritardo del gradiente) su quattro iniezioni. I dati indicano che l’area del picco è preservata tra i sistemi.
Confronto dell’area (%) tra il sistema ACQUITY UPLC I-Class PLUS e il sistema binario ACQUITY UPLC H-Class PLUS Bio (con miscelatore da 340 µL e ritardo del gradiente) su quattro iniezioni. I dati indicano che l’area del picco è preservata tra i sistemi.
Il workflow di mappatura dei peptidi del sistema BioAccord fornisce le identificazioni PTM. La figura mostra il pannello di analisi dei risultati dopo l’elaborazione automatizzata dei dati
Il workflow di mappatura dei peptidi del sistema BioAccord fornisce le identificazioni PTM. La figura mostra il pannello di analisi dei risultati dopo l’elaborazione automatizzata dei dati. La tabella dei componenti contiene: informazioni sulla sequenza, m/z e massa neutra, tolleranza di massa, % abbondanza relativa e informazioni sulla frammentazione per ciascun peptide. La tabella di riepilogo fornisce una panoramica concisa delle modifiche dei peptidi selezionati in tutti i campioni. La coerenza dei tempi di ritenzione è mostrata nel riquadro in basso a sinistra utilizzando i cromatogrammi TIC per le iniezioni 1 e 25.
Sovrapposizione IC delle iniezioni di standard mAb Tryptic Digest con IDC disattivato e IDC attivato con soglie di 5, 10 e 20. La tabella associata mostra le dimensioni totali del file, la percentuale di riduzione e il tempo di elaborazione dei dati con il sistema per l’informazione scientifica UNIFI
Sovrapposizione IC delle iniezioni di standard mAb Tryptic Digest con IDC disattivato e IDC attivato con soglie di 5, 10 e 20. La tabella associata mostra le dimensioni totali del file, la percentuale di riduzione e il tempo di elaborazione dei dati con il sistema per l’informazione scientifica UNIFI.
Profili XIC che dimostrano l’effetto della chimica di superficie delle particelle (BEH e silice) sulle selettività per peptidi triptici mAb NIST selezionati utilizzando TFA 0,1% in fasi mobili acqua/acetonitrile. I cromatogrammi sono stati allineati in base al tempo di ritenzione di H38. I valori MW e pI per i peptidi (Da) sono forniti nell’inserto della tabella. Le identità dei picchi sono fornite nella Tabella 3
Profili XIC che dimostrano l’effetto della chimica di superficie delle particelle (BEH e silice) sulle selettività per peptidi triptici mAb NIST selezionati utilizzando TFA 0,1% in fasi mobili acqua/acetonitrile. I cromatogrammi sono stati allineati in base al tempo di ritenzione di H38. I valori MW e pI per i peptidi (Da) sono forniti nell’inserto della tabella. Le identità dei picchi sono fornite nella Tabella 3.
Abbondanza relativa dei clivaggi mancati e non specifici per digeriti NISTmAb preparati utilizzando i workflow PeptideWorks manuali e automatizzati e un kit leader di tripsina immobilizzata. Le barre di errore rappresentano una deviazione standard. PeptideWorks offre una digestione più completa e specifica
Abbondanza relativa dei clivaggi mancati e non specifici per digeriti NISTmAb preparati utilizzando i workflow PeptideWorks manuali e automatizzati e un kit leader di tripsina immobilizzata. Le barre di errore rappresentano una deviazione standard. PeptideWorks offre una digestione più completa e specifica.
Digestione con rapporto enzima:proteina di 1:5 di Remicade, che mette in evidenza la pulizia della linea di base con RapiZyme Tripsina (blu) rispetto a un concorrente leader del settore (nero). L’asse Y è la % di intensità TIC
Digestione con rapporto enzima:proteina di 1:5 di Remicade, che mette in evidenza la pulizia della linea di base con RapiZyme Tripsina (blu) rispetto a un concorrente leader del settore (nero). L’asse Y è la % di intensità TIC.

Webinar e Risorse

Peptide Multi-Attribute Method (MAM) sul sistema BioAccord LC-MS Abilitato per SmartMS
Peptide Multi-Attribute Method (MAM) sul sistema BioAccord LC-MS Abilitato per SmartMS
  • eBook

Mappatura dei Peptidi per Prodotti Bioterapeutici

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  • Infografica

Digestione delle Proteine, Sempre più Intelligente

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  • Infografica

RapiZyme: Digestione Rapida, Pulita e Completa

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  • Infografica

RapiZyme: Utilizzo Flessibile 

RapiZyme: Utilizzo Flessibile 
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  • Poster

Nuovo Enzima Tripsina Resistente all’Autolisi per Workflow più Efficienti di Mappatura dei Peptidi Biofarmaceutici

Nuovo Enzima Tripsina Resistente all’Autolisi per Workflow più Efficienti di Mappatura dei Peptidi Biofarmaceutici
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  • Support Articles

Nuovo Metodo Automatizzato per la Preparazione dei Campioni per la Mappatura dei Peptidi

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Con le soluzioni Waters, che comprendono tecniche di spettrometria di massa intatta e di subunità, potrai valutare l’identità delle proteine, le glicoforme e le modifiche, in modo da comprendere le strutture delle proteine e far progredire la ricerca biofarmaceutica.

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