Colunas de fase reversa para peptídeos

Cromatografia de fase reversa

A cromatografia de fase reversa que utiliza reagentes de pareamento iônico, como TFA e ácido fórmico, pode fornecer separações altamente resolvidas de misturas complexas de peptídeos, (por exemplo, digestos trípticos de proteína ou longas sequências de peptídeos sintéticos) cujas sequências podem diferir por um único aminoácido. Em geral, a hidrofobicidade do peptídeo determina a ordem de eluição, sendo os peptídeos menos hidrofóbicos eluídos primeiramente. 

Fatores como composição de partículas (sílica ou híbridas), tamanho de poro (130 Å ou 300 Å), densidade de ligante, bem como condições de separação (por exemplo, duração do gradiente, temperatura de separação, taxa de fluxo), desempenham um papel importante na obtenção de uma separação que atenda aos requisitos da aplicação.

Da mesma forma que acontece com outras biosseparações, ao utilizar tamanhos de partículas menores, as opções de colunas UPLC/UHPLC proporcionam maior resolução dos componentes e em menos tempo em comparação com as colunas para HPLC para essa aplicação exigente.

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