단백질 역상 크로마토그래피는 짧은 리간드 길이 케미스트리(예: C4)와 넓은 공극 크기(예: 300Å)가 특징인 Solid-Core 입자로 충진된 다공성 또는 코팅형 컬럼에서 수행되며 용액 내 단백질을 소수성 차이를 바탕으로 샘플을 분리하는 기술입니다. 유기 용매 농도 Gradient는 원하지 않는 이온 상호작용을 최소화하는 이온쌍 시약(예: 0.1% TFA 또는 0.1% 포름산)이 존재하는 조건에서 단백질의 분리에 영향을 주기 위해 자주 사용됩니다. 일반적으로, 단백질이나 단백질 subunit의 소수성에 따라 용리 순서가 결정되며 소수성이 약한 단백질이 먼저 용리됩니다. 입자 구성, 공극 크기, 리간드 유형 및 밀도, 분리 조건(예: Gradient 지속 시간, 분리 온도, 유속)과 같은 요인은 모두 이 응용 분야의 요구 사항을 충족하는 분리 결과를 얻는 데 중요한 역할을 합니다.