Protocole optimisé

Le kit GlycoWorks RapiFluor-MS pour l'analyse des N-glycanes facilite la préparation, souvent compliquée et chronophage, des échantillons. 

• Protocole facile d'utilisation
• Conseils et astuces détaillés, fournis pour la mise en place
• Formation à la portée des utilisateurs non expérimentés

Préparation rapide d'échantillons

Grâce à une déglycosylation rapide associée à un marquage immédiat, l'ensemble du protocole, de la glycoprotéine à l'obtention de l'échantillon à analyser, ne vous prend désormais plus que 30 minutes*.

• Amélioration de l'efficacité du laboratoire
• Analyse des échantillons et interprétation rapides
• Grâce aux vidéos de démonstration disponibles en ligne, suivez le protocole étape par étape

* Pour les échantillons de mAb ; il peut s'avérer nécessaire d'adapter la déglycosylation en fonction de l'échantillon

Niveau de sensibilité inégalé

Le réactif RapiFluor-MS comprend un carbamate NHS comme agent de marquage rapide , un fluorophore efficace composé de quinoléine, ainsi qu'une amine tertiaire fortement basique destinée à améliorer l'ionisation MS. Contrairement aux autres réactifs de marquage rapide, cet agent carbamate NHS, s'hydrolyse dans le temps produisant du dioxyde de carbone et l'amine correspondante. Le marquage RapiFluor-MS se désactive ainsi.

Propriétés chimiques perfectionnées pour l'analyse des glycanes :

• Marquage rapide
• Efficacité de la fluorescence
• Amélioration de l'ionisation

Un kit pour 96 échantillons

Le kit GlycoWorks RapiFluor-MS pour l'analyse des N-glycanes offre suffisamment de produits pour traiter 96 échantillons, ou 4 séries de 24 échantillons.

• Produits de déglycosylation : tampon à façon Rapid PNGase F, tensioactif RapiGest SF, et étalon de contrôle mAb en masse intacte pour garantir le suivi du protocole.
• Produits de marquage : Solvant et réactif RapiFluor-MS.
• Produits de lavage : Plaque GlycoWorks HILIC µElution*, diluant de l'échantillon et tampon d'élution GlycoWorks.
• Produits de prélèvement des échantillons : Tubes, bouchons, plaques de collecte et d'évacuation des déchets nécessaires au traitement des échantillons.

* Un système "manifold" sous vide ou à pression positive est requis pour la plaque µElution.

Simplification de la caractérisation

RapiFluor-MS améliore non seulement la quantification par fluorescence, mais aussi l'intensité du signal par spectrométrie de masse. La détection en série par fluorescence et par spectrométrie de masse permettent dorénavant d'identifier et de caractériser facilement les glycanes de faible abondance. Une sensibilité accrue peut être atteinte même avec une plus faible quantité d'échantillons !

Au cours de l'analyse par chromatographie HILIC des glycanes marqués, la technique RapiFluor-MS a permis d'obtenir les résultats suivants :

• Analogue de l'aminobenzamide (AB), commercialisé et utilisé pour le marquage rapide ; signal de fluorescence 2 fois supérieur et signal MS 1000 fois plus élevé
• Amination réductrice classique avec le 2-AB ; signal de fluorescence 4 fois supérieur et signal MS 160 fois plus élevé

Attribuez une masse à chaque pic de glycanes

Le détecteur de masse ACQUITY QDa détecte automatiquement les glycanes marqués par RapiFluor-MS. 

• Un signal MS et FLR équivalente en une seule analyse, avec un avantage supplémentaire : la confirmation de la masse.
• Une accélération de la cadence d'analyse des glycanes ciblés, permettant ainsi le développement plus documenté des procédés de fabrication.
• Une intégration facile dans la méthode UPLC existante et conforme aux bonnes pratiques de fabrication réglementaires, grâce au logiciel Empower.