Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto
El Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto es un estándar de referencia de anticuerpo monoclonal (mAb) meticulosamente caracterizado, diseñado para facilitar el análisis cualitativo de proteínas intactas mediante cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS). Este estándar es fundamental en la identificación de proteínas, caracterización de mAb y detección de modificaciones postraduccionales, asegurando que los sistemas de espectrometría de masas estén óptimamente ajustados y calibrados para mediciones precisas y de alta resolución.
Derivado de una proteína de inmunoglobulina G1 (IgG1) de ratón intacta purificada mediante cromatografía de afinidad con proteína A, el Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto posee un peso molecular bien definido de 145,329.7 Daltons. Su composición molecular se detalla como C6472 H9940 N1698 O2008 S52, con 17 enlaces disulfuro que mantienen la estabilidad estructural. Notablemente, el N-terminal de cada cadena pesada sufre una modificación de ácido pirrolidónico, y hay un único sitio de glicosilación N-ligado por cadena pesada, resultando en cuatro glicofórmulas principales: G0, G0F, G1F y G2F. Esta precisa caracterización molecular convierte al estándar en una herramienta invaluable para evaluar el rendimiento del instrumento y el desarrollo de métodos en el análisis de masa intacta.
En aplicaciones prácticas, el Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto sirve como referencia confiable para la optimización rutinaria de espectrometría de masas, configuración del sistema y verificación de rendimiento. Proporcionando un punto de referencia consistente y reproducible, permite a los laboratorios afinar sus sistemas LC-MS, asegurando mediciones de masa precisas y detección robusta de modificaciones de proteínas.
Esto es particularmente crucial en el desarrollo biofarmacéutico, donde comprender el perfil molecular de los anticuerpos terapéuticos es esencial para evaluaciones de eficacia y seguridad.
Para los usuarios del flujo de trabajo de preparación de muestras de N-Glicanos GlycoWorks RapiFluor-MS, el Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto funciona como un control no etiquetado o estándar de referencia. Sus cuatro principales péptidos glicosilados reflejan aquellos comúnmente encontrados en mAbs terapéuticos, proporcionando un punto de referencia relevante para la validación de métodos y estudios comparativos. Esta alineación asegura que los flujos de trabajo de análisis de glicanos produzcan datos precisos y confiables, facilitando la caracterización de patrones de glicosilación críticos para la función y estabilidad de mAb.
El estándar se suministra como 1 mg de polvo liofilizado, estabilizado con sacarosa de grado liofilización, y empaquetado en viales TruView de Waters. Estos viales están específicamente diseñados para minimizar la adsorción de analitos, preservando la integridad de la muestra, especialmente para análisis de péptidos y proteínas. Tras la reconstitución, el estándar proporciona una solución estable y lista para usar para la integración inmediata en flujos de trabajo de LC-MS.
El Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto es un recurso esencial para laboratorios dedicados al análisis de proteínas y caracterización de anticuerpos monoclonales. Su definición molecular integral, junto con su papel en la calibración del sistema y la validación de métodos, apoya la generación de datos precisos y reproducibles en aplicaciones de espectrometría de masas de masa intacta. Al incorporar este estándar en sus protocolos analíticos, los científicos pueden mejorar la fiabilidad y precisión de sus análisis de proteínas, avanzando así en la investigación y desarrollo en el campo biofarmacéutico.
Preguntas Frecuentes
¿Cuáles son las propiedades moleculares clave del Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto?
El Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto es un anticuerpo monoclonal IgG1 de ratón completamente caracterizado con un peso molecular preciso de 145,329.7 Da. Su fórmula molecular es C6472 H9940 N1698 O2008 S52, reflejando su estructura compleja. Contiene 17 enlaces disulfuro, que contribuyen a la estabilidad estructural. El N-terminal de cada cadena pesada presenta una modificación de ácido pirrolidónico, una modificación postraduccional común en mAbs. Además, cada cadena pesada tiene un sitio de glicosilación N-ligado, resultando en cuatro glicofórmulas principales: G0, G0F, G1F y G2F. Estas propiedades lo convierten en una referencia confiable para la calibración del sistema LC-MS y el análisis de masa de proteínas intactas.
¿Cómo se caracteriza el Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto?
El Estándar de Verificación de Masa de mAb Intacto está completamente caracterizado mediante pruebas analíticas rigurosas, lo que asegura que sirva como un estándar de referencia confiable para LC-MS. Su peso molecular preciso (145,329.7 Da) y composición de glicofórmulas definidas proporcionan un punto de referencia consistente para el análisis de espectrometría de masas. Se purifica utilizando cromatografía de proteína A, asegurando alta pureza y reproducibilidad.
Los 17 enlaces disulfuro del estándar, la modificación de ácido pirrolidónico en el N-terminal y un único sitio de glicosilación N-ligado por cadena pesada mejoran aún más su caracterización. Debido a estos atributos estructurales bien definidos, es ideal para optimizar el rendimiento del espectrómetro de masas, la calibración del sistema y el análisis de modificaciones de proteínas en la investigación biofarmacéutica.
Patrón de comprobación de masa de mAb intacto
