逆相ペプチドの分離における XSelect™ Premier Peptide VanGuard FIT カラムの性能

Waters MaxPeak™ Premier 逆相カラムには、分析種とカラムハードウェア表面の間の望ましくない相互作用を最小限に抑えるように設計された MaxPeak High Performance Surface（HPS）ハードウェアが採用されています。このテクノロジーブリーフでは、分析カラムと同じ逆相ケミストリーが入っている Premier Peptide VanGuard™ FIT（完全統合テクノロジー）ガードカートリッジの使用は、ペプチド分離の質に大きな影響を及ぼさないことを示します。

目的

MaxPeak Premier Peptide VanGuard FIT 一体型ガードカートリッジが、ガードカラムデバイスなしの同じ Premier ペプチド逆相分析カラムと比較して、ペプチド分離の質に大きな影響を及ぼさないことを実証すること。

以前に、VanGuard FIT カラムにより、目的の分離を損なうことなく微粒子や化学的な汚れを防ぐことで、分析カラムの寿命が延びることが示されています¹。

MaxPeak Premier Peptide VanGuard FIT カートリッジには、分析種とカラム表面の相互作用を最小限に抑えるように設計された MaxPeak HPS ハードウェアが採用されています。これらのガードカートリッジは、同じ表面ケミストリーの粒子を含む MaxPeak Premier RP 分析カラムと合わせて機能するように設計されています。

図 1 に、XSelect Premier Peptide CSH™ C₁₈、2.5 µm VanGuard FIT カートリッジ（2.1 × 5 mm、製品番号：186010718）あり/なしの XSelect Premier Peptide CSH C₁₈ 130Å、2.5 µm カラム（2.1 × 150 mm、製品番号：186009906）を使用した、MassPREP™ ペプチド標準試料混合物（製品番号：186002337 または 186002338）の分離を示します。クロマトグラム（図 1a）とピークキャパシティー（図 1b）がいずれも非常に似通っています。予想どおり、Premier VanGuard FIT カートリッジが含まれる XSelect Premier Peptide カラムでの分離の方が、保持時間がわずかに長くなっています。

図 2 に XSelect Premier Peptide CSH C₁₈、2.5 µm VanGuard FIT カートリッジ（2.1 × 5 mm）あり/なしの XSelect Premier Peptide CSH C₁₈ 130Å、2.5 µm カラム（2.1 × 150 mm）での mAb トリプシン消化物標準試料（製品番号：186009126）の分離を示します。この場合も、クロマトグラムは非常に似通っており（図 2a）、10 本の最も大きなピークの保持時間が非常に良く相関しています（図 2b）。

XSelect Premier Peptide VanGuard FIT（完全統合テクノロジー）カートリッジは、同じ逆相ケミストリーを含む分析カラムでのペプチド分離の質（ピークキャパシティー、分離度、選択性）に大きな影響を及ぼしません。使用可能な MaxPeak Premier Peptide VanGuard FIT カートリッジケミストリーには、CSH C₁₈ 130 Å、BEH™ C₁₈ 130 Å、BEH C₁₈ 300 Å、HSS T3 ₁₈ 100 Å などがあります。XSelect Premier Oligo BEH C₁₈ 130 Å 分析カラムで使用できる XSelect Premier Oligo VanGuard FIT カートリッジもあります。上記の RP ケミストリー（ACQUITY™ Premier Peptide および ACQUITY Premier Oligo VanGuard FIT）の小粒子径バージョンが使用可能です。

1. Shiner S., Delano M., Lauber M., Rzewuski S., Warren B., McLaughlin J., and Byrd S. VanGuard FIT: A Breakthrough in Guard Column Performance for Challenging Chromatographic Separations.Waters Technology Brief, 2019, 720006500.