Trypsine RapiZyme de qualité MS 

Trypsine RapiZyme de qualité MS 

Digestion rapide, propre et complète des protéines

Digestion rapide, propre et complète des protéines

Les digestions de protéines pour la protéomique ascendante ou l’établissement de cartes peptidiques en biopharmacie sont entravées par des temps de digestion longs et des compromis complexes en matière de performances. L’équilibre entre la vitesse et l’exhaustivité de la digestion, tout en maintenant une reproductibilité élevée, de faibles artéfacts et une couverture de séquence complète, représente également un défi constant. Qui plus est, la productivité au cours de l’analyse des données est souvent perturbée par des cartes désordonnées avec différents pics non tryptiques (clivages manqués, pics d’autolyse, clivages non spécifiques et pics sans correspondance). Ces nombreux petits pics inattendus impliquent une identification chronophage, ce qui ralentit votre travail essentiel.

La trypsine RapiZyme de qualité MS (spectrométrie de masse) permet une vitesse et une propreté de digestion sans compromis grâce à sa résistance extrême à l’autolyse, sa pureté élevée et son activité plus efficace. Comme elle élimine pratiquement l’autolyse qui affecte même la trypsine la plus avancée du marché, la trypsine RapiZyme peut être utilisée à des concentrations relativement élevées pour accélérer les digestions sans avoir recours à des températures élevées ni compromettre l’achèvement de la digestion. Ainsi, elle améliore le temps de traitement des échantillons, les opérations de laboratoire et, plus important encore, elle permet de prendre des décisions critiques rapidement et toute confiance.

RapiZyme Trypsin used to improve protein digestions for biopharmaceutical peptide mapping or bottom-up proteomics. Trypsine RapiZyme de qualité MS
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Spécifications

Présentation

  • Réalisez des digestions efficaces en 30 minutes sans recourir à des températures élevées en permettant l’utilisation de rapports enzyme:protéine (E:P) plus élevés qui résistent à l’autolyse.
  • Analysez plus efficacement les données grâce à des lignes de base plus nettes.
  • Bénéficiez d’une couverture de séquence élevée pour une caractérisation et une identification fiables.
  • Obtenez la reproductibilité et la prévisibilité permises par la trypsine de séquence porcine exprimée par recombinaison chimiquement optimisée.
  • Améliorez la stabilité, le rendement des flacons et l’activité lors de la reconstitution pour disposer de performances constantes en lyophilisant avec un excipient compatible LC/MS.
  • Bénéficiez d’un produit robuste et flexible pour une utilisation dans de nombreux protocoles améliorant les workflows.

Utilisation recommandée : pour obtenir une meilleure digestion des protéines pour la protéomique ascendante et l’établissement de cartes peptidiques en biopharmacie.

Fonctionnement de la RapiZyme

La trypsine RapiZyme est une trypsine recombinante chimiquement optimisée. Comme elle n’est pas d’origine animale, elle ne contient pas de chymotrypsine contaminante, ne nécessite aucun traitement par des inhibiteurs de L-(tosylamido-2-phényl)éthyle chlorométhylcétone (TPCK) et ne pose donc aucun problème lié à la digestion non spécifique.

Digestions rapides

Une méthylation étendue et homogène confère à la trypsine RapiZyme une résistance extrêmement élevée à l’autolyse. Cela permet d’utiliser la trypsine RapiZyme pour des rapports E:P élevés (par exemple, 1:5) afin d’achever des digestions en 30 minutes seulement, sans avoir recours à des températures plus élevées. En utilisant Remicade® comme étude de cas, la trypsine RapiZyme délivre moins de 0,1 % de pics d’autolyse et moins de 1 % de clivages manqués (mesurés sous forme de % de la réponse totale du TIC). Une trypsine concurrente phare produit 6 à 7 % de pics d’autolyse et 4 à 5 % de clivages manqués dans les mêmes conditions.

Des lignes de base propres

Les décisions critiques sont prises en toute connaissance des plus petits changements sur une carte. Les autorités de réglementation exigent l’identification de chaque pic. Les pics sans correspondance, les pics d’artéfacts, les pics d’autolyse et les pics de clivage manqués sont tous des bruits chronophages et inutiles. Ils nécessitent un examen et une analyse scientifiques supplémentaires, ce qui augmente considérablement les temps de traitement des logiciels lorsque des pics non tryptiques ou des pics d’autolyse issus d’un modèle in silico de digestion trypsique sont inclus.

La trypsine RapiZyme vous permet de procéder rapidement et en toute confiance avec des lignes de base sans bruit ni pics d’artéfact, le tout avec une digestion en 30 minutes.

Reproductibilité et pureté : que contient votre trypsine ?

La trypsine RapiZyme est une trypsine méthylée homogènement et recombinante (non dérivée d’un animal), exempte de chymotrypsine contaminante. De plus, elle est lyophilisée avec un excipient compatible LC/MS pour rendre sa reconstitution facile et prévisible, mais aussi améliorer son rendement depuis le flacon.

Il en résulte une reproductibilité exceptionnelle d’un lot à l’autre et d’une digestion à l’autre.

Utilisation flexible

La trypsine RapiZyme répond à toutes les attentes que vous pouvez avoir par rapport à une trypsine (en solution ou immobilisée), et bien plus encore. La trypsine RapiZyme vous permet de remplir les objectifs suivants :

  • Éliminer le dessalement et améliorer la cohérence pour les applications de MAM, de suivi PTM, de biotraitement et de protéomique. La trypsine RapiZyme maintient une activité élevée avec de faibles quantités de chlorure de guanidinium.
    • Diluer le chlorure de guanidinium à 0,5–0,7 M et obtenir une digestion en 2 heures avec un rapport enzyme:protéine à 1:5 (pH 7,5).
  • Contrôler les artéfacts pour toute application privilégiant les digestions d’une nuit, sans compromettre l’efficacité de la digestion.
    • Digestion d’une nuit avec un rapport enzyme:protéine à 1:100 à température ambiante et pour un pH de 6,5.
  • Accélérer les digestions traditionnelles avec un rapport enzyme:protéine à 1:20 de 1 à 3 heures pour plus de flexibilité.
  • Chauffer et éliminer le besoin d’enzymes immobilisées pour des protéines plus simples ou plus faciles à digérer, grâce à la RapiZyme thermiquement stable.
    • Digestion avec un rapport enzyme:protéine à 1:10 pendant 1 heure à 70 °C.

Ressources

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RapiZyme Trypsin, Grade Spectrométrie de Masse (MS), redéfinit la digestion des protéines avec un équilibre inégalé de rapidité, propreté et efficacité, en faisant un outil essentiel pour la cartographie des peptides biopharmaceutiques et la protéomique ascendante. Conçu pour surmonter les défis courants des temps de digestion longs, des compromis complexes et des résultats imprévisibles, RapiZyme Trypsin offre une solution fiable qui accélère les flux de travail, améliore la reproductibilité et élimine les artefacts chronophages.

Les digestions de protéines ont traditionnellement eu du mal à maintenir une couverture de séquence élevée, peu d'artefacts et une reproductibilité sans sacrifier la rapidité ou la propreté. RapiZyme Trypsin se distingue en offrant des digestions rapides, propres et complètes, grâce à sa méthylation étendue et homogène, qui confère une résistance extraordinairement élevée à l'autolyse. Cette caractéristique innovante permet l'utilisation de rapports enzyme-protéine (E:P) élevés, permettant des digestions complètes en seulement 30 minutes sans recourir à des températures élevées ou compromettre la qualité de la digestion. Par exemple, sous un rapport E:P de 1:5, RapiZyme Trypsin atteint moins de 0,1 % de pics d'autolyse et moins de 1 % de clivages manqués, une amélioration significative par rapport aux enzymes concurrentes leaders de l'industrie qui produisent 6–7 % de pics d'autolyse et 4–5 % de clivages manqués dans les mêmes conditions.

Des lignes de base propres sont essentielles pour une prise de décision en toute confiance dans les environnements réglementaires, où chaque pic doit être identifié avec précision. RapiZyme Trypsin élimine le bruit des pics non appariés, des artefacts d'autolyse et des clivages non spécifiques, garantissant que vos cartes de données sont exemptes de distractions inutiles. En réduisant considérablement les temps de traitement et l'effort de révision scientifique, RapiZyme Trypsin améliore la productivité et accélère l'analyse, vous permettant de vous concentrer sur les informations qui comptent le plus.

La reproductibilité est une autre caractéristique de RapiZyme Trypsin, obtenue grâce à sa formulation recombinante chimiquement optimisée (non dérivée d'animaux). Contrairement à la trypsine traditionnelle, RapiZyme est exempt de chymotrypsine contaminante et ne nécessite pas de traitement avec des inhibiteurs TPCK, qui introduisent souvent des défis de digestion non spécifiques. L'enzyme est lyophilisée avec un excipient compatible LC-MS, améliorant la stabilité, l'activité et la récupération des flacons tout en garantissant des performances prévisibles et cohérentes à travers les lots et les digestions. Cette fiabilité fait de RapiZyme Trypsin un choix idéal pour les applications à enjeux élevés où la précision et la reproductibilité sont non négociables.

RapiZyme Trypsin est également remarquablement polyvalent, s'adaptant facilement à une variété de flux de travail. Pour les besoins de digestion rapide, il peut réaliser une digestion complète en 30 minutes avec un rapport E:P de 1:5 sans températures élevées. Pour les flux de travail plus traditionnels, il accélère les temps de digestion, permettant une digestion complète des protéines en 1 à 3 heures avec un rapport E:P de 1:20. Même les digestions nocturnes peuvent être effectuées à température ambiante avec un rapport E:P de 1:100, offrant des résultats cohérents tout en évitant les artefacts. De plus, RapiZyme Trypsin démontre une activité élevée même dans des quantités modestes de guanidine HCl, permettant des flux de travail sans désalinisation et une cohérence améliorée pour des applications telles que la Méthodologie des Attributs Multiples (MAM), le suivi des modifications post-traductionnelles (PTM), le biotraitement et la protéomique.

Lorsque la stabilité thermique est avantageuse, RapiZyme Trypsin prend en charge les digestions à des températures élevées, telles que les digestions d'une heure à 70°C avec un rapport E:P de 1:10, éliminant le besoin d'enzymes immobilisées. Cette flexibilité étend son applicabilité à une large gamme de protocoles, en faisant un outil polyvalent et puissant pour les laboratoires axés sur l'amélioration de l'efficacité opérationnelle et de la qualité des données.

RapiZyme Trypsin, Grade MS, établit une nouvelle norme pour la digestion des protéines en combinant rapidité, propreté et flexibilité sans compromettre la reproductibilité ou la qualité. Que vous réalisiez une cartographie des peptides pour des soumissions réglementaires ou que vous meniez des flux de travail de protéomique à haut débit, RapiZyme Trypsin offre des performances exceptionnelles, vous permettant de prendre des décisions critiques avec confiance et précision.

FAQs

1. Quel est le rapport enzyme-protéine (E:P) recommandé ?
Le rapport enzyme-protéine (E:P) optimal pour RapiZyme Trypsin dépend de vos exigences de flux de travail, mais sa résistance élevée à l'autolyse permet une flexibilité remarquable. Pour des digestions rapides, un rapport de 1:5 est recommandé, permettant une digestion complète en seulement 30 minutes sans recourir à des températures élevées. Pour les flux de travail standard, un rapport de 1:20 peut réaliser une digestion complète en 1 à 3 heures, offrant un équilibre entre rapidité et efficacité. Si vous préférez une digestion nocturne, un rapport de 1:100 à température ambiante (pH 6,5) garantit des résultats cohérents et sans artefacts.

2. Pour quelles applications RapiZyme Trypsin est-il le mieux utilisé ?
RapiZyme Trypsin est idéalement adapté pour la cartographie des peptides biopharmaceutiques et la protéomique ascendante. Sa résistance inégalée à l'autolyse et sa haute pureté le rendent parfait pour les flux de travail nécessitant une digestion rapide, propre et reproductible des protéines. Des applications telles que la Méthodologie des Attributs Multiples (MAM), le suivi des modifications post-traductionnelles (PTM) et l'analyse réglementaire des peptides bénéficient grandement de leur capacité à offrir des lignes de base plus propres et moins de pics non tryptiques. De plus, la stabilité et l'adaptabilité de RapiZyme Trypsin en font un outil précieux pour les applications de biotraitement et de protéomique qui exigent précision, couverture de séquence élevée et résultats sans artefacts.