Colonnes GTx pour thérapies géniques

Chromatographie en phase inverse sur lipides pour l’analyse de la composition et des impuretés des LNP

Alors que les nanoparticules lipidiques (NPL) restent un vecteur fiable pour l’administration de charges utiles de pointe, comme les cellules CAR-T in vivo, le recours à des analyses lipidiques plus avancées devient indispensable. La capacité à séparer, quantifier et identifier de manière optimale les composants des LNP et les impuretés étroitement apparentés est essentielle pour garantir l’innocuité, l’efficacité et la cohérence. La LC en phase inverse optimisée pour les lipides joue un rôle important en permettant une caractérisation détaillée de diverses classes de lipides qui, en fin de compte, influent sur les performances d’administration, la stabilité et les résultats thérapeutiques globaux.

Les colonnes en phase inverse pour lipides GTxResolve offrent une sélectivité unique et une hydrophobie optimisée, spécialement adaptées à l’analyse des lipides. Conçues à partir de particules à porosité superficielle de 230 Å et d’une surface chargée positivement, ces colonnes améliorent la finesse de pic, la résolution et la reproductibilité pour les espèces lipidiques difficiles à analyser. Les chimies de colonne optimisées C₁₈+ et Phenyl‑Hexyl+ permettent de mettre en place des workflows fiables et évolutifs, depuis les premières phases de développement jusqu’aux essais de contrôle qualité et CMC.

Découvrez les colonnes en phase inverse pour lipides GTxResolve

Chromatographie d’exclusion stérique et chromatographie slalom pour l’analyse de la pureté, la caractérisation biophysique et les tests indicateurs de stabilité

La technologie SEC permet de réaliser rapidement des analyses indicatrices de stabilité afin de contrôler l’intégrité des produits et de surveiller leur agrégation et leur fragmentation. Elle prend également en charge l’analyse par remplissage vectoriel, le profilage LNP, la caractérisation des impuretés et la quantification multi-attributs lorsqu’elle est associée à la diffusion de lumière multi-angles (MALS). La gamme de colonnes GTxResolve offre un faible bruit MALS et un équilibrage rapide, grâce à la robustesse de la technologie de particules hybrides à pont éthane (BEH).

La colonne GTxResolve Premier BEH SEC 450 Å, 2,5 µm offre une faible adsorption et des séparations hautement efficaces pour les analytes de 100 à 500 Å, ce qui la rend idéale pour l’analyse des AAV et la séparation sgRNA/ARNm en vue de la quantification de la charge utile des LNP. Pour les biomolécules de plus grande taille, les colonnes GTxResolve Premier SEC 1 000 Å et 2 000 Å élargissent la plage de taille grâce à l’utilisation de particules réticulées BEH et à la technologie MaxPeak Premier bio-inerte, afin de minimiser les interactions secondaires tout en préservant l’efficacité de séparation. La colonne de 1 000 Å (plage de diamètres entre 200 et 800 Å) permet de préserver l’intégrité de l’ARNm, ainsi que celle des petites LNP (< 80 nm), des agrégats d’AAV et des particules de type viral (VLP). La colonne de 2 000 Å (plage de diamètres entre 800 et 2 500 Å) est adaptée aux LNP de grande taille, aux plasmides et aux vecteurs lentiviraux. Ces deux colonnes peuvent également être combinées pour permettre la caractérisation des vaccins polysaccharidiques.

Pour les acides nucléiques de grande taille, les colonnes GTxResolve Slalom offrent un mode de séparation unique pour l’ADN double brin (2,5 à 25 kbp) et les plasmides, garantissant une haute résolution, une grande sensibilité et une analyse ultra-rapide (< 5 minutes). Les colonnes Slalom permettent de réaliser des analyses telles que le suivi de l’IVT de l’ARNm, l’évaluation de l’efficacité de la linéarisation des plasmides, la cartographie des enzymes de restriction et le profilage topologique.

Découvrez les colonnes SEC à larges pores et les colonnes GTxResolve Slalom

Phase inverse avec appariement d’ions pour l’analyse de l’intégrité et de la pureté, ainsi que pour la purification

Les méthodes analytiques avancées de chromatographie liquide en phase inverse avec appariement d’ions peuvent contribuer à garantir l’identité, la pureté, l’intégrité et les modifications attendues des oligonucléotides et des acides nucléiques dans le cadre des thérapies géniques.

Les colonnes ACQUITY et XBridge Premier Oligonucleotide BEH C18 sont dotées de surfaces haute performance et le sorbant est testé par lot par rapport aux oligonucléotides afin de garantir des séparations fiables et d’obtenir facilement des résultats essentiels.

Afin d’accompagner les workflows, de la recherche au contrôle qualité en passant par la purification, Waters propose une large gamme de colonnes à phase inverse à appariement ionique destinées à l’analyse des oligonucléotides. Il s’agit notamment des colonnes LC-MS à microdébit pour une sensibilité accrue, des colonnes à échelle analytique pour la caractérisation de routine et le profilage des impuretés, ainsi que des colonnes OBD préparatives pour une purification évolutive. Ensemble, ces plateformes offrent des options flexibles en matière de sélectivité, de format et de vitesse d’analyse, afin de répondre aux besoins en constante évolution du développement thérapeutique des oligonucléotides et des acides nucléiques.

Découvrez une sensibilité améliorée grâce aux colonnes GTxResolve Microflow
Obtenez une meilleure résolution N-1 grâce aux colonnes RPLC pour oligonucléotides
Obtenez un meilleur rendement grâce aux colonnes de purification d’oligonucléotides

Chromatographie HILIC pour la thérapie génique

Les colonnes HILIC peuvent retenir des oligonucléotides de synthèse, de l’ARN guide simple brin (ARNsg), de l’ARN messager (digestions ARNm) et des protéines de capside virale sans avoir besoin de réactifs d’appariement d’ions dans la phase mobile. Vérifiez vos performances en matière de pureté, de variants de taille, de séquences d’échec, de modifications nucléotidiques et de variants de squelette dans un tampon compatible MS. Les colonnes GTxResolve Premier Amide sont testées en double lot avec des étalons de protéines et d’oligonucléotides afin de garantir des performances chromatographiques optimales pour les séparations des thérapies cellulaires et géniques. 

Découvrir les colonnes GTxResolve Premier HILIC

Échange d’anions pour les vecteurs viraux, les oligonucléotides et les acides nucléiques

L’échange d’anions est une technique puissante pour les vecteurs viraux, les oligonucléotides et les acides nucléiques, dans la mesure où ils sont tous anioniques.

Les colonnes Protein-Pak Hi Res Q et Gen-Pak FAX présentent deux chimies uniques pour la réalisation de tests visant à vérifier le remplissage des vecteurs, à mesurer le titre et à contrôler la topologie/l’intégrité. La colonne Protein-Pak Hi Res Q contient une résine de type amine quaternaire (SAX) à particules de 5 µm. La colonne Gen-Pak FAX contient un sorbant DEAE WAX à particules de 2,5 µm à rétention plus faible.

Découvrez les colonnes analytiques AEX

Étalons d’oligonucléotides et d’acides nucléiques

Une sélection d’étalons chromatographiques différents est disponible, notamment des oligonucléotides individuels, des ensembles d’échelles d’ADN à simple brin (ADNsb), un oligonucléotide anti-sens conjugué à des lipides et une échelle d’ADN à double brin (ADNdb) plus large.

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RPLC à l’échelle préparative pour les oligonucléotides synthétisés chimiquement

Une HPLC préparative est régulièrement réalisée pour purifier les oligonucléotides synthétisés chimiquement.

Les colonnes OBD (Optimal Bed Density) de Waters avec un diamètre intérieur de 10 à 50 mm, garnies de particules C₁₈ hybrides à ponts éthane (BEH) testées pour les oligonucléotides, offrent des configurations à haute efficacité et à longue durée de vie pour un procédé aussi critique.

Découvrir les colonnes préparatives Oligonucleotide RPLC