利用Xevo™ MRT多反射超高分辨质谱进行保健品中那非类物质的筛查

在保健品市场中，非法添加那非类物质的现象日益凸显，部分保健品生产商为逃避检测，添加那非类化合物的衍生物、副产物或对其进行化学修饰，这些经化学改造的物质多未经过系统毒理学试验，其潜在毒性、代谢路径及长期健康影响均不明确，却可能通过类似药理作用对人体造成更复杂的危害。本实验基于 Xevo MRT MS 开展保健品中那非类物质的检测，该仪器具备超高的质谱分辨率、优异的质量精度及高灵敏度，能够为快速筛查非法添加的那非类物质提供强有力的技术支撑，可有效应对保健品中此类物质的隐蔽添加问题。

样品前处理

称取 10 mg试样置于2 mL 离心管中，加入 1 mL甲醇，超声提取15 min；12,000 rpm，4 ˚C下离心10 min ；取上清液用于LC-MS分析。

• Waters Xevo™ MRT MS采用多反射超高分 辨率飞行时间（MRT）技术可在较宽的m/z 范围内提供始终如一的质谱分辨率和优异的质量精度，即使在100 Hz的扫描速率下分辨率结果也不会受到影响。
• Xevo MRT MS经过精心设计，将高端技术 融入台式平台中，可帮助用户解决棘手难题。创新的采集系统配备双增益模数转换器，在高动态范围内亦可保持长期的系统稳定性，从而确保始终如一的优异数据质量、耐用性和重现性。
• 在Xevo MRT质量分析器内(见图1)，4 m飞行 路径将发生总共8次反射，在高达100 Hz的扫描速率下，分辨率可达100,000 FWHM， 实现出色的MS/MS性能。

数据处理软件

使用waters_connect™平台进行数据采集，可视化及数据处理。

1. 如图2所示，为95种那非类物质的色谱叠加图，其色谱分离度良好。

2. 如图3所示，那非类的化合物可以获得100K FWHM的分辨率和亚ppm级质量精度。

3. 本实验基于化合物保留时间、质量准确性、同位素峰、碎片离子匹配度四个指标进行那非类物质筛查， 如图4a所示是样品加标0.05 mg/kg后的筛查结果界面，其中以化合物西地那非为例，其保留时间偏差为0.04 min，质量偏差为0.9 ppm，同位素峰RMS值偏差＜10%；此外有多个碎片离子质量偏差在1 mDa以内，见图4b，满足定性筛查需求。

4. 在开展定性筛查工作的同时，waters_connect 平台可同步支持对检测数据的绝对定量分析，以西地那非筛查结果为例，其标准曲线及重现性结果如图 5 所示。实验数据显示，在 1 ng/mL 浓度下，连续 6 针检测的相对标准偏差（% RSD）为 2.48；在 0.1-100 ng/mL 浓度范围内，线性相关系数 R²=0.998，满足定量分析要求。

5. 部分不良保健品生产厂商为规避监管检测，违规添加新型的那非类化合物，仅依赖已有的筛查数据库不能满足对这类未知物的定性。waters_connect 的 Discovery 功能可一键完成未知物的元素组成分析、ChemSpider 在线搜库及二级碎片确证，如图 6a 所示，成功识别出样品中一种新的那非成分，且该成分的二级碎片与推测结构高度匹配（图 6b），显示出waters_connect对未知非法添加物的高效识别与结构确证优势。

6. 95种那非类物质数据库列表

本实验采用ACQUITY Premier UPLC-Xevo MRT MS结合waters_connect平台对保健品进行非法添加的那非类物质进行筛查：

• Xevo MRT MS采用多反射超高分辨率飞行时间（MRT）技术，可以为那非类物质的检测提供100K FWHM的分辨率和亚ppm级的质量精度；
• waters_connect一体化数据处理支持从数据采集、可视化到定性 / 定量分析的全流程处理，可同步 完成那非类物质的定性筛查与绝对定量（如西地那非在 0.1-100 ng/mL 浓度范围内线性相关系数 R²=0.998，RSD=2.48%，满足定量要求）；Discovery 功能可一键实现未知物的元素组成分析、 ChemSpider 在线搜库及二级碎片确证，成功识别新型那非类衍生物，解决传统筛查数据库无法覆盖 未知修饰物的问题；
• 本研究建立了 95 种那非类物质的检测方法，该方法色谱分离度良好，基于保留时间、质量准确性、 同位素峰、碎片离子匹配度四项指标进行筛查，结果显示，加标样品中西地那非的保留时间偏差仅 0.04 min，质量偏差为 0.9 ppm，同位素峰 RMS 值偏差＜10%，且多个碎片离子质量偏差≤1 mDa，满足定性筛查要求。该方法结合 Xevo MRT MS 的高分辨率与高灵敏度，以及 waters_connect 平台的高效数据处理能力，可有效应对保健品中那非类物质（包括隐蔽添加的衍生物及修饰物）的筛查需求。

1.  BJS 202405 食品中西地那非、他达拉非等化合物的测定。

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