ACQUITY™ UPLC™ I-Class SM-FL/Xevo™ TQ Absolute系统：用于游离睾酮的分析性能
摘要
Waters™ ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD系统可用于定量分析人类生物液体基质中的有机化合物。
本文档所述的实验评估了ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD系统对血清中游离睾酮的分析性能。
简介
Waters™ ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD系统可用于定量分析人类生物液体基质中的有机化合物。
本文档所述的实验评估了ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD系统对血清中游离睾酮的分析性能。
实验
ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD系统由MassLynx™软件(v4.2)控制，使用TargetLynx™ XS应用管理软件进行数据处理。标准曲线样品使用52.75 mM HEPES缓冲液制备，pH调节至7.4，以匹配样品前处理过程所产生的透析液的组成。样品处理的方法条件如下：
样品前处理条件
200 μL样品使用平衡透析培养处理，然后用甲基叔丁基醚处理，并进行液-液萃取，得到最终萃取物以供分析。
液相色谱条件
|
样品管理器： |
SM-FL（PL，禁用“提前装入”） |
|
溶剂管理器： |
BSM |
|
色谱柱： |
ACQUITY UPLC BEH™ C18 1.7 µm, 2.1 mm x 100 mm |
|
流动相A： |
0.2 mM氟化铵水溶液 |
|
流动相B： |
0.2 mM氟化铵的甲醇溶液 |
|
流速： |
0.30 mL/min |
|
梯度： |
50%流动相B保持0.5 min，0.5 min时升至55%流动相B， 在2.7 min内从55%升至75%流动相B，然后在0.05 min内从75%升至98%流动相B，随后保持98%流动相B 0.45 min，然后以50%流动相B平衡系统0.7 min |
质谱条件
|
分辨率： |
MS1 (0.75 FWHM)，MS2 (0.75 FWHM) |
|
采集模式： |
MRM |
|
极性： |
ESI (+) |
结果与讨论
ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD系统分析游离睾酮的性能特征如表1所示。色谱分离的分析灵敏度如图1所示。
表1.游离睾酮的性能特征。范围由线性拟合r2 >0.995定义。LLOQ由S/N (PtP) > 10且%RSD ≤ 20%定义。通过分析灵敏度实验确定LLOQ水平的%RSD，实验总共进行了五次独立测定，n=50。使用血清制备QC样品并进行五次独立测定(n = 25)，以此评估QC总精密度和重复性。通过比较测定值与所有实验室修正后的平均结果(ALTM)确定EQA平均偏差(n=45)。
图1.ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/ Xevo TQ Absolute IVD系统分析游离睾酮的色谱图
结论
本研究证明，Waters ACQUITY UPLC I-Class SM-FL/Xevo TQ Absolute IVD系统能够分析血清样品中的游离睾酮，并能提供出色的分析灵敏度和精密度。
免责声明
本文列出的分析性能数据仅用于说明目的。沃特世并非旨在推荐或建议采用本文介绍的分析物分析方法。文中数据仅用于证明所述系统对于普遍采用液相色谱-串联质谱系统进行分析的代表性分析物的分析性能。由于实验室方法、所用材料、操作人员本身技术水平和系统条件等多方面的因素，不同实验室的方法性能可能会有所差异。本文档不对适销性或针对任何特定用途的适用性构成明示或暗示的担保，包括对本次分析中的分析物的检测。
720008233ZH，2024年2月
