• 应用纪要

XSelect™ Premier VanGuard FIT肽分析专用柱的肽反相分离性能

XSelect™ Premier VanGuard FIT肽分析专用柱的肽反相分离性能

  • Hua Yang
  • Stephan M. Koza
  • Steve Shiner
  • Waters Corporation

摘要

Waters MaxPeak™ Premier反相色谱柱配有MaxPeak高性能表面(HPS)硬件,能够尽可能减少分析物-色谱柱硬件表面之间的不良相互作用。在本技术简报中,我们证明使用装填与分析柱相同的反相填料的Premier VanGuard™ FIT(完全集成技术)肽分析专用保护柱芯,不会对肽分离质量产生显著影响。

目的

证明相较于不装配保护装置的同款Premier肽反相分析柱,使用MaxPeak Premier VanGuard FIT肽分析专用集成保护柱芯不会对肽分离质量产生显著影响。

简介

之前的研究表明,VanGuard FIT保护柱可防止颗粒物和化学物质污染,从而延长分析柱的使用寿命,而不会影响所需分离效果1

MaxPeak Premier VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯配备MaxPeak HPS硬件,能够尽可能减少分析物-色谱柱表面相互作用。这些保护柱芯经过专门设计,可与装填表面化学性质相同的颗粒的MaxPeak Premier RP分析柱配合使用。

实验

图1展示了MassPREP™肽混标(P/N:186002337186002338)在配备和不配备XSelect Premier CSH C18, 2.5 µm VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯(2.1 x 5 mm,P/N:186010718)的XSelect Premier CSH™ C18 130 Å, 2.5 µm肽分析专用柱(2.1 x 150 mm,P/N:186009906)上的分离结果。色谱图(图1a)和峰容量(图1b)都非常相似。如我们所料,使用配备Premier VanGuard FIT保护柱芯的XSelect Premier肽分析专用柱获得的保留时间略长。

在配备和不配备XSelect Premier CSH C18, 2.5 µm VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯(2.1 x 5 mm)的XSelect Premier CSH C18 130 Å, 2.5 µm肽分析专用柱(2.1 x 150 mm)上分离MassPREP肽混标
图1.在配备和不配备XSelect Premier CSH C18, 2.5 µm VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯(2.1 x 5 mm)的XSelect Premier CSH C18 130 Å, 2.5 µm肽分析专用柱(2.1 x 150 mm)上分离MassPREP肽混标。
a.反相色谱图,UV检测波长为214 nm;
峰容量比较
图1b.峰容量比较

图2是在配备和不配备XSelect Premier CSH C18, 2.5 µm VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯(2.1 x 5 mm)的XSelect Premier CSH C18 130 Å, 2.5 µm肽分析专用柱(2.1 x 150 mm)上分离mAb胰蛋白酶酶解标准品(P/N:186009126)得到的结果。同样,两幅色谱图看起来非常相似(图2a),丰度前十的峰的保留时间相关性非常好(图2b)。

在配备和不配备XSelect Premier CSH C18, 2.5 µm VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯(2.1 x 5 mm)的XSelect Premier CSH C18 130 Å, 2.5 µm肽分析专用柱(2.1 x 150 mm)上分离mAb胰蛋白酶酶解标准品
图2.在配备和不配备XSelect Premier CSH C18, 2.5 µm VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯(2.1 x 5 mm)的XSelect Premier CSH C18 130 Å, 2.5 µm肽分析专用柱(2.1 x 150 mm)上分离mAb胰蛋白酶酶解标准品。
a.反相色谱图,UV检测波长为214 nm;
丰度前十的峰的保留时间相关性
图2b.丰度前十的峰的保留时间相关性

结论

XSelect Premier VanGuard FIT(完全集成技术)肽分析专用保护柱芯不会显著影响装填有相同反相填料的分析柱的肽分离质量(峰容量、分离度和选择性)。MaxPeak Premier VanGuard FIT肽分析专用保护柱芯的可选填料包括CSH C18 130 Å、BEH™ C18 130 Å、BEH C18 300 Å和HSS T3 C18 100 Å。还提供可配合XSelect Premier BEH C18 130 Å寡核苷酸分析专用分析柱使用的XSelect Premier VanGuard FIT寡核苷酸分析专用保护柱芯。以上反相填料都有小粒径版本(ACQUITY™ Premier VanGuard FIT肽分析专用版本和ACQUITY Premier VanGuard FIT寡核苷酸分析专用版本)。

参考资料

  1. Shiner S., Delano M., Lauber M., Rzewuski S., Warren B., McLaughlin J., and Byrd S. VanGuard FIT: A Breakthrough in Guard Column Performance for Challenging Chromatographic Separations.Waters Technology Brief, 2019, 720006500.

特色产品

720008106ZH,2023年11月

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