使用Oasis PRiME HLB小柱有效净化肉类提取物

脂肪和磷脂对仪器和色谱柱而言是非常棘手的潜在污染物。在本研究中，Oasis PRiME HLB小柱提供了一种在LC-MS分析前对肉类提取物进行快速净化以去除这些物质的方法。

优势

展示在UPLC-MS分析之前采用Oasis PRiME HLB小柱净化肉类提取物的效率。

沃特世为肉中兽药多残留LC-MS/MS筛查开发了优化的样品前处理和分析方案。典型肉类样品的主要成分是水（高达70%）、蛋白质(15-25%)、脂肪(5-25%)和磷脂(1-3%)。在提取过程中，蛋白质可以通过沉淀和离心去除。然而，大量脂肪和磷脂随着目标兽药一起提取出来。这些共提取物质的存在可能会干扰LC-MS分析，污染UPLC系统的分析柱和其它组件，并且还会污染质谱仪。在过去，分析人员采用繁琐的正己烷脱脂步骤或使用反相吸附剂（如硅胶C₁₈）从肉类提取物中去除脂肪。虽然这些技术可以有效去除脂肪，但均不能去除磷脂。

解决方案

使用Oasis PRiME HLB小柱通过式净化可以从肉类提取物中高效地去除脂肪和磷脂。同样重要的是，Oasis PRiME HLB小柱净化不会影响兽药的回收率。该方法的回收率与使用正己烷脱脂法或硅胶C₁₈净化法得到的回收率相当，但使用Oasis PRiME HLB小柱时的净化效率更高。

初步提取。从兽药中选择具有代表性的化合物，称取5 g猪肉样品（含15%脂肪）并匀浆，加入10 mL含0.2%甲酸的乙腈/水(80:20)进行提取。将样品涡旋混合30秒、振摇30分钟，然后在12000 rpm下离心5分钟。 

Oasis PRiME HLB小柱净化。将Oasis PRiME HLB小柱（3 cc，60 mg）安装在预先清洁过的真空导管上。无需执行小柱活化步骤。取约0.5 mL的上清液，使其通过Oasis PRiME HLB小柱并收集滤液。进行UPLC-MS/MS分析之前，用10 mM甲酸铵缓冲溶液(pH 4.5)将收集到的样品稀释3倍。

所有被测化合物在通过式净化步骤中均无损失或损失极少。除保泰松(32%)外，其余被测化合物的绝对回收率（主要通过测量初始液相提取步骤的效率所得）的平均值超过了80%。上述回收率与使用硅胶C₁₈净化方法的结果相当，但硅胶C₁₈不能去除磷脂。UPLC-MS/MS条件和色谱图如图1所示。图2所示的色谱图展示了Oasis PRiME HLB小柱去除磷脂的效率；它比硅胶C₁₈净化方法多去除了90%以上的磷脂。通过重量分析，我们还测得Oasis PRiME HLB小柱去除了猪肉提取物中90%以上的共提取脂肪。

• Oasis PRiME HLB小柱在使用前不需要活化或平衡；其简单的一步式SPE净化非常有效
• Oasis PRiME HLB小柱去除了猪肉样品的乙腈提取物中90%以上的脂肪和磷脂
• 采用Oasis PRiME HLB小柱通过式的净化不会影响待测化合物的回收率，还能有效去除提取物中的脂肪和磷脂