Reversed-Phase-Säulen für Oligonukleotide

Reversed-Phase-Säulen für Oligonukleotide

Erzielen Sie branchenführende pH-Wert- und Temperaturtoleranz sowie außergewöhnliche Auflösung mit den Waters Reversed-Phase-Säulen für Oligonukleotide bei der Charakterisierung und Verunreinigungsanalyse von Oligonukleotiden. Jeder Sorbens-Batch wird einer Qualitätskontrolle (QC) mit Oligonukleotid-Standards unterzogen, um die Leistung und Reproduzierbarkeit von Charge zu Charge sicherzustellen.

Erzielen Sie branchenführende pH-Wert- und Temperaturtoleranz sowie außergewöhnliche Auflösung mit den Waters Reversed-Phase-Säulen für Oligonukleotide bei der Charakterisierung und Verunreinigungsanalyse von Oligonukleotiden. Jeder Sorbens-Batch wird einer Qualitätskontrolle (QC) mit Oligonukleotid-Standards unterzogen, um die Leistung und Reproduzierbarkeit von Charge zu Charge sicherzustellen.
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Übersicht

Zur Charakterisierung synthetischer Oligonukleotide und zur Analyse von Verunreinigungen ist die Ionenpaar-Reversed-Phase(IPRP)-Chromatographie die Methode der Wahl. Diese Methode hilft Wissenschaftlern, synthese- und prozessbedingte Verunreinigungen besser aufzutrennen als jede andere chromatographische Technik, einschließlich Anionenaustausch (AEX), HILIC und SEC. Doch auch bei dieser Technik gibt es Herausforderungen. Mehrere Faktoren können sich direkt auf die Trennleistung und Reproduzierbarkeit auswirken, darunter die Reinheit und Stabilität der Ionenpaar-Reagenzien, unspezifische Adsorption an der chromatographischen Hardware und Chargenschwankungen des Sorbens. Für optimale Trennungen erfordert die IPRP hohe pH-Werte und Temperaturen, was Säulenmaterialien mit hoher pH- und Temperaturtoleranz voraussetzt.

Vertrauen Sie auf Ihre Ergebnisse mit den Reversed-Phase-Säulen für Oligonukleotide von Waters, die Folgendes bieten: 

  • Branchenführende pH-Wert- und Temperaturstabilität mit der BEH C18 Hybrid-Silika-Partikeltechnologie für eine außergewöhnliche Auflösung und Lebensdauer der Säule.
  • Eine drastische Reduzierung der nicht-spezifischen Adsorption (NSA) mit der MaxPeak Premier High-Performance Surfaces (HPS) Technologie für maximale Empfindlichkeit, Reproduzierbarkeit und Produktivität.
  • Oligonukleotid-basierte QC-Tests zur Sicherstellung der Chargen-zu-Chargen-Trennleistung und -Reproduzierbarkeit.

Verbesserte Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit ohne Säulenkonditionierung

Verbesserte Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit ohne Säulenkonditionierung

Nukleinsäuren, einschließlich Oligonukleotide, sind polyanionisch (negativ geladen) und adsorbieren in Edelstahlsäulen leicht an Metalloxidoberflächen. Die MaxPeak Premier Säulen für Oligonukleotide von Waters verfügen über eine inerte, organische/anorganische Hybridoberflächenchemie auf Silikabasis, die NSA von Nukleinsäuren nahezu ausschließt und für eine höhere Empfindlichkeit, Reproduzierbarkeit und Produktivität sorgt.  Mit Waters kann Ihr Labor die zeitaufwendige Säulenpassivierung und Probenkonditionierung vor der Analyse vermeiden.

Außergewöhnliche Auflösung synthetischer Oligonukleotide

Außergewöhnliche Auflösung synthetischer Oligonukleotide

Die IPRP-Chromatographie synthetischer Oligonukleotide löst Probenbestandteile auf Grundlage von kleineren Änderungen in Größe, Ladung und Hydrophobizität auf. Waters ACQUITY (UPLC: Partikelgröße 1,7 µm) und XBridge (HPLC/UHPLC: Partikelgröße 2,5 µm) Premier BEH C18 Säulen für Oligonukleotide liefern eine außergewöhnliche Probenauflösung, Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit.

Hervorragende Säulenlebensdauer

Hervorragende Säulenlebensdauer

Die ACQUITY und XBridge Premier Säulen für Oligonukleotide von Waters sind mit Waters BEH (Ethylene Bridged Hybrid) C18 Hybrid-Silika-Partikeln gepackt und zeigen eine außergewöhnliche Säulenlebensdauer unter hohen pH- und Temperaturbedingungen bei gleichzeitig herausragender Trennleistung.

Lösungen

2,1 x 20 mm Säulen für ultraschnelle Trennungen

2,1 x 20 mm Säulen für ultraschnelle Trennungen
ACQUITY Premier 2,1 x 20 mm BEH C18 Säulen für Oligonukleotide

Oligonukleotide und längere Nukleinsäuren weisen einen starken On/Off-Bindungs- und Elutionsmechanismus auf, wodurch sie für „ballistische Gradienten“ und ultraschnelle Trennungen geeignet sind. Dadurch kann die Produktivität in Testlaboren mit hohem Durchsatz verbessert werden. Die ACQUITY Premier BEH C18 2,1 × 20 mm Säulen für Oligonukleotide von Waters haben Porengrößen von 130 Å und 300 Å und ermöglichen ultraschnelle Trennungen von Shortmer- (10-40 nt) bzw. Longmer-Oligonukleotiden (> 40 nt).

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  • Ultrafast Oligonucleotide Separations
  • Reversed-Phase Analysis

MaxPeak Premier Wide-Pore (300 Å) Säulen für Longmer-Oligonukleotide

MaxPeak Premier Wide-Pore (300 Å) Säulen für Longmer-Oligonukleotide
MaxPeak Premier Wide-Pore (300 Å) Säulen

Sowohl ACQUITY (1,7 µm) als auch XBridge (2,5 µm) Premier Säulen für Oligonukleotide sind in Porengrößen von 130 Å und 300 Å erhältlich, die je nach Länge des Oligonukleotids Unterschiede im Retentionsverhalten und in der Peakschärfe aufweisen. Die größere Oberfläche von Partikeln mit einer Porengröße von 130 Å sorgt für eine höhere Retention und Auflösung von Shortmer-Oligonukleotiden (< ~40 mer), wohingegen Partikel mit einer Porengröße von 300 Å eine größere Diffusion und eine verbesserte Auflösung von längeren Oligonukleotiden (> ~40 mer) ermöglichen.

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  • Long-mer Oligonucleotide Separations
  • Reversed-Phase Analysis

MaxPeak Premier 1 mm Microflow Säulen für Oligonukleotide

MaxPeak Premier 1 mm Microflow Säulen für Oligonukleotide
MaxPeak Premier 130 Å und 300 Å Säulen

Microflow-Säulen mit MaxPeak Premier Technologie erzielen die Empfindlichkeit und Wiederfindungsraten, die durch MaxPeak Premier 2,1-mm-ID-Säulen etabliert wurden, und senken dabei den Proben- und Lösungsmittelverbrauch erheblich. Diese Microbore-Säulen kombinieren die unübertroffene UPLC-Effizienz der MaxPeak Premier Hardware mit HILIC-Chemie, die für Microflow optimiert ist, wodurch unspezifische Bindungen für verbesserte Reproduzierbarkeit und Empfindlichkeit minimiert werden. Indem sie den Lösungsmittelabfall reduzieren und weniger Ausgangsprobe benötigen, ermöglichen diese Säulen Pharmaforschungsunternehmen, Entwicklungsgruppen und DMPK-Forschern, tiefgreifendere, datengestützte Erkenntnisse mit einer bis zu 4-fach höheren Effizienz zu gewinnen.

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  • HILIC Analysis
  • Reversed-Phase Analysis

Oligonukleotid- und Nukleinsäurestandards zum Benchmarking der Leistung

Oligonukleotid- und Nukleinsäurestandards zum Benchmarking der Leistung
Oligonukleotid- und Nukleinsäurestandards

Waters bietet eine Reihe hochwertiger, chargenrückverfolgbarer Analysestandards, die unsere Reversed-Phase-Säulen für Oligonukleotide ergänzen, um Systemeignungstests, Methodenentwicklung und Fehlersuche zu erleichtern. Dazu gehören der MassPREP Oligonucleotide Standard von Waters, der eine 15 – 35mer oligodT-Leiter zur Qualitätskontrolle aller Säulen für Oligonukleotide von Waters enthält, ein 20mer ssDNA-Standard für das Benchmarking von LC-MS/MS-Fragmentierungen und Sequenzanalysen, ein lipidkonjugiertes, stark modifiziertes Antisense-Oligonukleotid (ASO), ssDNA- und dsDNA-Leitern und mehr.

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  • Reversed-Phase Analysis
  • Oligonucleotide Separations

VanGuard FIT Säulen für eine verlängerte Säulenlebensdauer

VanGuard FIT Säulen für eine verlängerte Säulenlebensdauer
VanGuard FIT Säule

Alle ACQUITY und XBridge Premier BEH C18 Säulen für Oligonukleotide sind im VanGuard FIT Säulenformat erhältlich, das eine vollständig integrierte 5-mm-Vorsäulenkartusche enthält, die mit demselben Sorbens gepackt ist und als Schutz dient, um eine Verschmutzung der analytischen Trennsäule zu verhindern. Das vollständig integrierte Design hat keine Auswirkungen auf die Probenauflösung. Die Kartusche kann bei Verschmutzungen leicht ausgetauscht werden, wodurch die Lebensdauer Ihrer analytischen Trennsäule verlängert wird.

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  • Reversed-Phase Analysis
  • Oligonucleotide Separations

Applikationen

Waters hat mehr als 30 Applikationsmitteilungen zur Charakterisierung von Oligonukleotiden und Analyse von Verunreinigungen mit unseren technologieführenden Tools für die Flüssigchromatographie und Massenspektrometrie zu therapeutischen und diagnostischen Zwecken erstellt. Die folgenden aktuellen Beispiele veranschaulichen unsere umfassenden Applikationskenntnisse und die neuesten, fortschrittlichsten Tools.

Waters hat mehr als 30 Applikationsmitteilungen zur Charakterisierung von Oligonukleotiden und Analyse von Verunreinigungen mit unseren technologieführenden Tools für die Flüssigchromatographie und Massenspektrometrie zu therapeutischen und diagnostischen Zwecken erstellt. Die folgenden aktuellen Beispiele veranschaulichen unsere umfassenden Applikationskenntnisse und die neuesten, fortschrittlichsten Tools.

Applikationsmitteilungen

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Colorful 3D rendering of an oligonucleotide

Als doppelsträngige RNA stellen small interfering RNA (siRNA)-Oligonukleotid-Therapeutika einzigartige analytische Herausforderungen dar. Diese Applikationsmitteilungen beschreiben sowohl nicht denaturierende als auch denaturierende chromatographische Trennungen.

Als doppelsträngige RNA stellen small interfering RNA (siRNA)-Oligonukleotid-Therapeutika einzigartige analytische Herausforderungen dar. Diese Applikationsmitteilungen beschreiben sowohl nicht denaturierende als auch denaturierende chromatographische Trennungen.

Applikationsmitteilungen

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Die Nukleotidsequenz diagnostischer und therapeutischer Oligonukleotide ist entscheidend für deren Spezifität und Funktion. Es ist daher unerlässlich, ihre Sequenz genau zu bestätigen. LC-MS-Workflows ermöglichen eine 100 %ige Sequenzbestätigung von Oligonukleotiden und bieten die einzigartige Möglichkeit, die Identität und Position modifizierter Nukleotide in der Sequenz zu bestätigen, und zwar unabhängig davon, ob es sich um synthetische Oligonukleotide oder um solche handelt, die durch einen Nukleaseverdau längerkettiger Nukleinsäuren erzeugt wurden (z. B. mRNA oder ssDNA-Oligo-Mapping-Workflow).

Die Nukleotidsequenz diagnostischer und therapeutischer Oligonukleotide ist entscheidend für deren Spezifität und Funktion. Es ist daher unerlässlich, ihre Sequenz genau zu bestätigen. LC-MS-Workflows ermöglichen eine 100 %ige Sequenzbestätigung von Oligonukleotiden und bieten die einzigartige Möglichkeit, die Identität und Position modifizierter Nukleotide in der Sequenz zu bestätigen, und zwar unabhängig davon, ob es sich um synthetische Oligonukleotide oder um solche handelt, die durch einen Nukleaseverdau längerkettiger Nukleinsäuren erzeugt wurden (z. B. mRNA oder ssDNA-Oligo-Mapping-Workflow).

Applikationsmitteilungen

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Zu den wichtigsten Qualitätsmerkmalen von mRNA-basierten Therapeutika und Impfstoffen gehören die Bestätigung der Länge und Polydispersität des PolyA-Tails sowie der Identität des 5’-Caps und aller möglichen vorhandenen Varianten mit geringer Konzentration. Diese Applikationsmitteilungen demonstrieren diese Analysen mittels Ionenpaar-Reversed-Phase-Chromatographie.

Zu den wichtigsten Qualitätsmerkmalen von mRNA-basierten Therapeutika und Impfstoffen gehören die Bestätigung der Länge und Polydispersität des PolyA-Tails sowie der Identität des 5’-Caps und aller möglichen vorhandenen Varianten mit geringer Konzentration. Diese Applikationsmitteilungen demonstrieren diese Analysen mittels Ionenpaar-Reversed-Phase-Chromatographie.

Applikationsmitteilungen

Applikationsmitteilungen

Von der anfänglichen Entdeckung bis zu den späteren Phasen der Entwicklung von Arzneimitteln ist ausreichend aufgereinigtes Oligonukleotidmaterial erforderlich, um eine Reihe verschiedener Studien zu ermöglichen und die Aufreinigungsverfahren zu verbessern. In dieser Applikationsmitteilung werden sowohl ein kostengünstiger systematischer Ansatz mit hohem Durchsatz für analytische Trennungen als auch ein präparatives Aufreinigungsverfahren für ein 20-mer-Oligonukleotid vorgestellt.

Von der anfänglichen Entdeckung bis zu den späteren Phasen der Entwicklung von Arzneimitteln ist ausreichend aufgereinigtes Oligonukleotidmaterial erforderlich, um eine Reihe verschiedener Studien zu ermöglichen und die Aufreinigungsverfahren zu verbessern. In dieser Applikationsmitteilung werden sowohl ein kostengünstiger systematischer Ansatz mit hohem Durchsatz für analytische Trennungen als auch ein präparatives Aufreinigungsverfahren für ein 20-mer-Oligonukleotid vorgestellt.

Applikationsmitteilungen

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Die Daten sprechen für sich

Die Daten sprechen für sich
Vier aufeinanderfolgende Injektionen von 3 µL Duplex C (0,40 mg/mL) mit der ACQUITY Premier BEH C18, 300 Å Säule für Oligonukleotide.
Vier aufeinanderfolgende Injektionen von 3 µL Duplex C (0,40 mg/mL) mit der ACQUITY Premier BEH C18, 300 Å Säule für Oligonukleotide.
Bestimmung der Fraktionsreinheit für einen 25-mg-Aufreinigungslauf
Bestimmung der Fraktionsreinheit für einen 25-mg-Aufreinigungslauf
Vollständige Sequenzabdeckung (100 %), dargestellt im Dot-Map-Format, erzeugt durch eine ungezielte MSE-Fragmentierung bei hoher Energie.
Vollständige Sequenzabdeckung (100 %), dargestellt im Dot-Map-Format, erzeugt durch eine ungezielte MSE-Fragmentierung bei hoher Energie. 
Experimentelles Chromatogramm, beobachtet mit einem 1,33-minütigen, konkaven (logarithmischen) Gradienten auf einer ultrakurzen ACQUITY Premier 2,1 x 20 mm Säule für Oligonukleotide bei F = 1,5 mL/min und T = 70 °C
Experimentelles Chromatogramm, beobachtet mit einem 1,33-minütigen, konkaven (logarithmischen) Gradienten auf einer ultrakurzen ACQUITY Premier 2,1 x 20 mm Säule für Oligonukleotide bei F = 1,5 mL/min und T = 70 °C.

Webinare und Ressourcen

  • Poster

LC- und LC-MS-Verbrauchsmaterialien für die Biotrennung – Poster

LC- und LC-MS-Verbrauchsmaterialien für die Biotrennung – Poster
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  • Infografik

ACQUITY Premier Säulen für die Analyse von Oligonukleotiden – Infografik

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  • User Manuals

ACQUITY UPLC und ACQUITY Premier Oligonukleotid-BEH-C18-Säulen – Handbuch zu Pflege und Verwendung

ACQUITY UPLC und ACQUITY Premier Oligonukleotid-BEH-C18-Säulen – Handbuch zu Pflege und Verwendung
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  • User Manuals

Standard für die Oligonukleotid-Trennungstechnologie – Handbuch zu Pflege und Verwendung

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XBridge und XBridge Premier BEH C18 Säulen für Oligonukleotide – Handbuch zu Pflege und Verwendung

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  • eBook

E-Book Aufreinigung von Oligonukleotiden

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  • eBook

Leitfaden zur Quantifizierung von Oligonukleotiden

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Erfahren Sie mehr über die Reversed-Phase-Säulen für Oligonukleotide.

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