Espectrometria de massas de detecção de carga

Espectrometria de massas de detecção de carga

Medição direta sem precedentes para a caracterização de biomoléculas de mega massa

Medição direta sem precedentes para a caracterização de biomoléculas de mega massa

Para quem se dedica à pesquisa científica, a caracterização de moléculas grandes com métodos convencionais pode ser enganosa e fundamentalmente limitante quando se trata de compreender a biologia e os mecanismos de doenças. Enquanto isso, quem trabalha no desenvolvimento de processos farmacêuticos a montante com novas modalidades precisa contar com abordagens tediosas e caras de tentativa e erro para a caracterização de biomoléculas grandes.

A espectrometria de massas de detecção de carga (CDMS, Charge Detection Mass Spectrometry) tem o potencial de abordar as limitações da espectrometria de massas convencional na resolução de complexos nativos de mega massa intacta. Com a tecnologia de CDMS, demonstramos a medição de massa direta precisa, exata e de alto rendimento e a caracterização de modalidades de mega massa, incluindo medicamentos genéticos, bioterapêuticos, vacinas e complexos proteicos, além da determinação do peso molecular, da pureza e da heterogeneidade de biomoléculas na faixa de megadalton e além, tudo a partir de um dispositivo de bancada.

Quer saber mais? Conheça o trabalho inovador de cientistas e colaboradores da Waters na seção de recursos.

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Charge detection mass spectrometry (CDMS) addresses the limitations of conventional mass spectrometry in resolving native intact mega-mass complexes. Espectrometria de massas de detecção de carga

Blog: O que a CDMS pode fazer pelo seu laboratório?

Explore novas possibilidades com a caracterização de rotina sem precedentes de biomoléculas de mega massa em nosso último blog sobre a Tecnologia de CDMS da Waters.

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3D rendering of green virus cells floating on a black background

Visão geral

  • Meça moléculas grandes diretamente para revelar seus estados nativos e entender as nuances das funções biológicas
  • Analise e caracterize diretamente modalidades de mega massa com precisão, exatidão e rendimento, abrindo as portas para novas possibilidades
  • Determine caminhos biológicos envolvendo complexos de proteínas, como proteassomas, por meio da caracterização nativa
  • Desenvolva terapias baseadas em mRNA e AAV (Vírus adenoassociados) de forma rápida e eficiente com conformidade regulatória para a determinação de atributos críticos de qualidade (CQAs, Critical Quality Attributes)
  • Transforme seu entendimento sobre a eficácia e a segurança dos vetores de vírus adenoassociados recombinantes (rAAV, Recombinant Adeno-Associated Virus) medindo com exatidão as informações sobre a relação vazio-parcial-cheio 
  • Compreenda a integridade e a heterogeneidade do DNA de plasmídeos utilizado em terapias genéticas
  • Avalie as características das partículas semelhantes a vírus (VLPs, Virus-Like Particles) utilizadas em vacinas, como as contra chikungunya ou hepatite B

Uso recomendado: Para a medição direta de produtos biológicos na faixa de megadalton e além.


Caracterização de rotina de analitos dentro do regime de megadalton e além

Como uma técnica analítica de massa ultra-alta, a CDMS utiliza a tecnologia de captura de íons eletrostáticos linear (ELIT, Electrostatic Linear Ion Trap) para fornecer medição direta de íons individuais por meio da determinação simultânea de sua relação massa/carga (m/z) e carga (z). Com a CDMS, seu laboratório pode determinar informações exatas de peso molecular e revelar a heterogeneidade das amostras. As aplicações de CDMS se expandem para uma variedade de modalidades, incluindo glutamato desidrogenase, plasmídeos de DNA, bacteriófagos, capsídeos virais, vacinas, partículas semelhantes a vírus e nanopartículas.


Avaliação de rotina e exata da integridade do produto de rAAVs

A CDMS com ionização por electrospray (ESI, Electrospray Ionization) pode ser uma ferramenta poderosa para acelerar o desenvolvimento de processos e apoiar o controle de qualidade de rAAVs. Ela é capaz de distinguir partículas vazias, cheias e parcialmente cheias de capsídeos de rAAVs com facilidade e rapidez, além de fornecer quantificação relativa. A CDMS também pode ser utilizada para identificar os sorotipos de rAAVs e para estudar o gene de interesse (GOI, Gene of Interest) por meio da ejeção do genoma.


Medição direta da massa intacta de complexos de proteínas – nenhuma deconvolução necessária

A CDMS possibilita a medição direta de grandes complexos de proteínas, revelando seus estados nativos e permitindo que os cientistas obtenham insights mais profundos sobre os mecanismos das funções biológicas. Aqui é mostrado um exemplo da medição de massa do 28-mer intacto do proteassoma da partícula core 20S (20S CP). A massa intacta do complexo foi medida diretamente (734 kDa) com desvio de < 2% em comparação com o valor de massa relatado na literatura. 

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