Columnas de HPLC y UPLC Protein-Pak

Columna de cromatografía de interacción hidrófoba (HIC) Hi Res Protein-Pak y estándar de proteínas HIC

Las columnas HIC Hi Res Protein-Pak contienen partículas no porosas de polimetacrilato (2,5 μm) funcionalizadas con un recubrimiento de ligando de butilo y son adecuadas para la caracterización de proteínas y compuestos bioterapéuticos, incluidos los anticuerpos monoclonales (mAb) y los conjugados anticuerpo-fármaco (ADC).

• Son adecuadas para las separaciones hidrofóbicas que se utilizan para la caracterización de proteínas en condiciones no desnaturalizantes.
• El uso de partículas no porosas permite separaciones eficaces y rápidas para hacer frente a las necesidades de alto rendimiento.
• Se entregan con el estándar analítico de proteínas HIC de Waters para ayudar a comprobar que el funcionamiento del instrumento y de la columna HIC sea aceptable.
• Su uso es adecuado para el análisis de conjugados anticuerpo-fármaco (ADC) con cisteína.

Columnas de intercambio iónico (IEX) Hi Res Protein-Pak

Las columnas IEX Hi Res Protein-Pak se han desarrollado para facilitar la caracterización de proteínas recombinantes, anticuerpos monoclonales y otros compuestos biológicos. Gracias a la característica no porosa de estas partículas y a su alta capacidad de enlace con compuestos, se obtiene una resolución extraordinaria para las especies con carga en un tiempo menor que el que necesitan muchos de los productos IEX porosos tradicionales. Asimismo, los análisis de control de calidad con estándares de proteínas definidos ayudan a garantizar un rendimiento constante entre lotes.

• Están diseñadas para la caracterización de variantes de carga de proteínas y otros biocompuestos.
• Disponen de dos intercambiadores catiónicos (carboximetil y sulfopropil) y un intercambiador aniónico (amonio cuaternario) que se ajustan a las necesidades de selectividad.
• El uso de fases estacionarias no porosas y de alta capacidad permite separaciones rápidas que hacen frente a necesidades de alto rendimiento.
• Se han sometido a controles de calidad con estándares de proteínas para garantizar la uniformidad entre lotes.
• Incorporan la tecnología eCord para ayudar a controlar el uso de las columnas con los sistemas ACQUITY UPLC.

Columnas de intercambio iónico de vidrio

Los materiales de relleno HR Protein-Pak se componen de partículas de polimetacrilato rígidas e hidrófilas con grandes poros de 1000 Å. El polímero hidrófilo por naturaleza reduce la adsorción no específica y permite la recuperación cuantitativa de la bioactividad y la masa de las proteínas. Estos rellenos son compatibles con tampones que tienen un pH entre 2 y 12; asimismo, soportan la exposición a las soluciones cáusticas.

Los intercambiadores iónicos HR Protein-Pak están disponibles con:

• Grupo funcional Q, un intercambiador aniónico fuerte
• DEAE, un intercambiador aniónico débil
• SP, un intercambiador catiónico fuerte
• CM, un intercambiador catiónico débil

Los materiales de relleno HR Protein-Pak de 8 µm y 15 µm se encuentran disponibles previamente empaquetados dentro de las columnas de vidrio Advanced Purification (AP) de Waters. Estas columnas son compatibles con diversos tipos de instrumentos de LC preparativos y analíticos.

Columnas de exclusión por tamaño

Los rellenos Protein-Pak se componen de partículas de sílice de 10 μm con enlaces diol y presentan diversos tamaños de poros y configuraciones de columnas. Las columnas SEC Protein-Pak:

• Son capaces de resolver proteínas que difieren en el doble del peso molecular
• Pueden distinguir proteínas que difieren en tan solo un 15% en peso molecular

El grado de resolución depende más del volumen y de la masa de la muestra que de la interacción entre la muestra y la fase estacionaria. Lo ideal sería que no hubiese ninguna interacción entre la fase estacionaria y las moléculas de la muestra. Las posibles interacciones se reducen al añadir sales con concentraciones entre 0,1 y 0,3 M.

Columnas activadas por resinas epoxi Affinity

El relleno de afinidad activado por resinas epoxi Protein-Pak se compone de partículas de 40 µm que tienen un tamaño de poro de 500 Å y una capa de unión hidrofílica con un grupo funcional glicidoxipropilo, lo que da lugar a un brazo espaciador de siete átomos. La superficie activada por resinas epoxi puede inmovilizar una amplia gama de ligandos a través de una unión covalente con grupos sulfhidrilo, hidroxilo y amino utilizando procedimientos de combinación sencillos.

Para el screening de métodos o la separación a pequeña escala, se recomienda optar por la comodidad que aportan las microcolumnas previamente empaquetadas. Las separaciones a gran escala pueden obtenerse con facilidad por medio del material de relleno a granel de las columnas de vidrio Advanced Purification (AP). Para determinar el volumen del lecho empaquetado para una cantidad conocida de relleno de afinidad activado por resinas epoxi Protein-Pak, utilice lo siguiente: Relleno de afinidad activado por resinas epoxi Protein-Pak que se ha utilizado (g) x 2 = volumen del lecho empaquetado (mL).