Colonne GTxResolve Premier BEH Amide
Analisi ad alta risoluzione compatibili con MS per un’ampia gamma di applicazioni GTx
La cromatografia liquida a interazione idrofila (HILIC) è ampiamente utilizzata per la ritenzione e l'analisi di analiti polari, consentendo agli analisti di separare oligonucleotidi a singolo e doppio filamento lunghi fino a 100 residui.
Accelera l’analisi degli analiti polari con i metodi Waters GTxResolve Premier BEH Amide, che offrono agli sviluppatori di farmaci un approccio di piattaforma per più analiti e rappresentano una valida alternativa ai metodi di accoppiamento ionico in fase inversa (IP-RP) che richiedono sistemi LC e LC-MS dedicati.
- Le colonne GTxResolve Premier Amide sono sottoposte a test in doppio lotto per garantire un rendimento cromatografico ottimale per il trattamento terapeutico genico.
- La robusta fase stazionaria a legame ammidico offre numerose possibilità di separazione per un’ampia gamma di acidi nucleici e proteine virali.
- Riduci la necessità di lunghi condizionamenti della colonna utilizzando componenti hardware per colonne a basso adsorbimento per migliorare il recupero.
- Elimina la dipendenza dall’esecuzione delle separazioni con i sistemi LC-MS dedicati per l’accoppiamento ionico.
Colonne GTxResolve Premier BEH Amide
Specifiche
Panoramica
- Implementazione delle separazioni complementari alla cromatografia liquida in fase inversa con accoppiamento ionico (RPLC)
- Preparazione di fasi mobili semplici a base di ammonio prive di coppie ioniche
- Sviluppo di opzioni di separazione versatili per oligonucleotidi, sgRNA CRISPR, mRNA e proteine del capside virale
- Utilizzo di hardware a basso adsorbimento che consente un elevato recupero del campione anche dalla prima iniezione
- Maggiore sicurezza sapendo che ogni colonna è testata in doppio lotto con materiali di riferimento sia proteici che oligonucleotidici
Uso Consigliato: per migliorare la comprensione terapeutica con i saggi che indicano la stabilità e la potenza.
Valutazione dei duplex di siRNA e delle loro impurezze a singolo filamento
L’analisi di siRNA in condizioni sia denaturanti che non denaturanti consente la caratterizzazione completa dei prodotti e delle relative impurezze. I ricercatori possono applicare facilmente i metodi HILIC in condizioni sia denaturanti che non denaturanti per supportare le misurazioni di purezza e identità dell’RNA interferente breve (siRNA). A temperatura ambiente, il duplex sottoposto ad annealing mantiene la sua struttura. Al di sopra della temperatura di fusione (~40 °C), il duplex si dissocia nei singoli componenti. La natura delicata della fase mobile tamponata di HILIC consente la formazione del duplex e supporta la presenza di RNA a singolo filamento (ssRNA) non ibridato in eccesso. Questi approcci sono molto promettenti sia per i test di sviluppo che di rilascio.
Analisi delle proteine del capside virale
HILIC è un’alternativa all’analisi in fase inversa per la separazione dei componenti delle particelle simil-virali (VLP) e delle isoforme delle proteine del capside dei vettori virali. I rapporti e le modifiche delle proteine virali possono essere valutati con la rivelazione UV, MS e di fluorescenza. Le varianti ossidate e fosforilate possono essere facilmente risolte dalle loro controparti non modificate con una separazione HILIC applicata in modo ottimale.
Dimensionamento degli acidi nucleici fino a 100 mer con HILIC
È possibile ottenere una migliore risoluzione degli oligonucleotidi e degli acidi nucleici digeriti utilizzando una colonna GTxResolve Premier BEH Amide e le relative particelle di sorbente ottimizzate. Sebbene i sorbenti con diverse dimensioni dei pori mostrino una risoluzione cromatografica simile per nucleotidi di lunghezza ridotta, il sorbente a pori larghi da 300 Å offre una separazione notevole fino all’ordine dei 100 mer. L’utilità di pori più grandi non si osserva solo per gli acidi nucleici, ma consente anche la diffusione di proteine di dimensioni maggiori che comprendono i capsidi virali. Le particelle a pori larghi consentono separazioni versatili per un’ampia gamma di trattamenti terapeutici genici.
